嵌合抗原受体T细胞（Chimeric antigen receptor Tcell, CAR-T）免疫疗法是将应用基因修饰技术制备表达，嵌合抗原受体(Chimeric antigen receptor, CAR)的T淋巴细胞，经体外扩增后再回输至患者体内的一种个体化治疗方法。近年来，随着Kymriah, Yescarta 以及 Strimvelis等细胞治疗产品陆续推上市场，慢病毒作为细胞装载CAR过程的关键中间载体，确保慢病毒为基础的药物质量和安全性挑战巨大。去年年底FDA公布调查CAR-T疗法的安全性问题—T细胞癌症风险的出现被认为源于其使用的基因递送载体-慢病毒载体后，于今年1月31日正式发布“ Considerations for the development of Chimeric Antigen Receptor (CAR) T Cell Products"指导原则。当中建议根据风险评估来确定载体拷贝数（VCN）的放行标准。风险评估包括插入位点分析、克隆优势、剂量、适应症、研究人群等研究支持的实验数据。国家药品监督管理局药品审批中心（CDE）发布的《基因修饰细胞治疗产品非临床研究与技术指导原则》也将“插入突变风险评估"作为非临床安全性研究的内容，并详细规定关键风险因素的评估要点，因此CAR-T治疗需要评估潜在的插入突变风险和致癌性风险。
Fig 1. Results of CBPL0002 by NGS (Probe capture method).通过NGS（捕获探针法测序）技术，结合生信分析方法，选取1000×以上Reads数的基因进行Sanger以及ddPCR法验证，同时采用ddPCR方法检测整合频率。多种方法相结合，准确定位慢病毒插入位点以及整合频率。
