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干細(xì)胞因具備自我更新與多向分化潛能，在再生醫(yī)學(xué)、疾病治療和精準(zhǔn)醫(yī)療等領(lǐng)域具有重要科研與應(yīng)用價值。然而，由于其獨(dú)·特的生理特性（如靜息狀態(tài)、高效外排機(jī)制和特殊膜結(jié)構(gòu)等），干細(xì)胞的基因編輯與核酸遞送一直面臨效率低、重復(fù)性差、細(xì)胞損傷大等技術(shù)瓶頸。近日，西湖大學(xué)聯(lián)合西湖凝聚體研究團(tuán)隊(duì)，成功開發(fā)出基于內(nèi)源蛋白凝聚體的創(chuàng)新遞送平臺——ProteanFect™。該產(chǎn)品能夠高效轉(zhuǎn)染包括 iPSCs、ESCs、MSCs、CD34? 造血干細(xì)胞在內(nèi)的多種難轉(zhuǎn)染干細(xì)胞，不僅提升基因遞送效率，同時有效保持干細(xì)胞的干性與功能完整性。

ProteanFect 與傳統(tǒng)方法相比具有顯著優(yōu)勢

iPSCs：高效基因編輯 + 優(yōu)異細(xì)胞狀態(tài)

來自斯坦福大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)利用 ProteanFect 成功遞送 PE7 先導(dǎo)編輯系統(tǒng)至 PBMC 衍生的 iPSC，并實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)點(diǎn)突變（c.757G>T），進(jìn)一步驗(yàn)證了該試劑在難轉(zhuǎn)染干細(xì)胞中的高效基因編輯能力。

圖1. 利用ProteanFect遞送PE7系統(tǒng)進(jìn)入iPSCs進(jìn)行堿基編輯

此外，研究團(tuán)隊(duì)還表示，ProteanFect 可謂“國貨之光"，其在 iPSC 轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞狀態(tài)“特別好"，“基本沒有死細(xì)胞"，且操作更加簡便，成功解決了干細(xì)胞轉(zhuǎn)染中效率低和毒性高的難題。

CD34? 造血干細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率達(dá) 72.3%

此外，ProteanFect 在人 CD34⁺ 造血干細(xì)胞中也展現(xiàn)了卓·越性能：不僅實(shí)現(xiàn)了高達(dá) 72.3% 的轉(zhuǎn)染效率，同時不影響細(xì)胞的正常分化。這一數(shù)據(jù)表明，該技術(shù)在提升基因遞送效率的同時，能夠有效維持干細(xì)胞的生理功能。

攻克 MSC 轉(zhuǎn)染難題

北醫(yī)三院的研究團(tuán)隊(duì)使用 ProteanFect Max 完成了 UCMSC 的懸浮狀態(tài)轉(zhuǎn)染，mRNA-GFP 轉(zhuǎn)染效率達(dá)到 70–80%。

基于內(nèi)源蛋白凝聚體的創(chuàng)新遞送機(jī)制

ProteanFect 技術(shù)基于蛋白質(zhì)-核酸相互作用的生物物理學(xué)原理，利用內(nèi)源蛋白與核酸在特定條件下自組裝形成納米級復(fù)合物。這些復(fù)合物具有特定的尺寸和表面電荷特性，能通過非受體依賴的內(nèi)吞途徑高效穿透干細(xì)胞膜。

與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方法相比，ProteanFect 在干細(xì)胞遞送中的獨(dú)·特優(yōu)勢：

1. 避免細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)：轉(zhuǎn)染過程不激活細(xì)胞應(yīng)激通路；

2. 不影響干性：保持干細(xì)胞的增殖能力和分化潛能完整性；

3. 內(nèi)源蛋白遞送：通過特異性內(nèi)吞途徑進(jìn)入細(xì)胞，同時天然降解其余蛋白；

4. 操作簡便：無需專業(yè)設(shè)備，適用于日常實(shí)驗(yàn)和高通量應(yīng)用。

ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒產(chǎn)品信息

基于上述實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的凝聚體遞送機(jī)制，西湖凝聚體開發(fā)了 ProteanFect™ 系列轉(zhuǎn)染試劑盒：

轉(zhuǎn)染試劑盒

ProteanFect™ Max 轉(zhuǎn)染試劑盒（PT02）：適用于iPSCs、ESCs、MSCs、CD34⁺ 等干細(xì)胞以及原代 T 細(xì)胞和多種難轉(zhuǎn)細(xì)胞系的 mRNA、siRNA 和質(zhì)粒遞送。

基因編輯應(yīng)用

ProteanFect™ CRISPRMax Cas9 轉(zhuǎn)染試劑盒（PT05）：適用于 CRISPR-Cas9、Base Editor、Prime Editor 等基因編輯系統(tǒng)在干細(xì)胞中的應(yīng)用