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生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)物質(zhì)的制備保存

閱讀:1586        發(fā)布時間:2014-9-26
         一般實驗的對照有空白對照、陰性對照、實驗組、陽性對照。空白對照就是生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)基里面一點(diǎn)篩選因子都沒有,直接涂板,估計就是LZ做出來的樣子。陰性對照就是在篩選的培養(yǎng)基里面涂菌,一般不會長細(xì)菌。實驗組略過。陽性對照按照試驗組來做。

 

采樣用的容器使用前應(yīng)蓋好瓶蓋,用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,置干燥箱160-170℃干熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保存也很重要,如保存不當(dāng)可使樣品中的大腸菌群細(xì)菌死亡或在一定條件下再生長,這些都將影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。檢測室接到水樣后,應(yīng)立即檢測,如因故不能檢測時,應(yīng)立即將樣品置于冰箱內(nèi)(2-10℃)并于2小時內(nèi)檢測。

   

多管發(fā)酵法所使用的培養(yǎng)液在分裝于各發(fā)酵管中后,應(yīng)將發(fā)酵管盡快放于高壓蒸汽滅菌器中,在115℃滅菌20min(注意:這個溫度也應(yīng)控制好,既達(dá)到滅菌的作用,還要防止培養(yǎng)物質(zhì)分解流失),然后貯存于冰箱或暗處備用。濾膜法所采用的M-FC培養(yǎng)基多使用外購的成品,培養(yǎng)基中苯胺藍(lán)的純度和質(zhì)量往往影響菌落的顏色,因此,無菌包裝的成套培養(yǎng)基在使用前,先接種典型糞大腸菌,以觀察對比菌落的顏色,來鑒定其穩(wěn)定性。

 

結(jié)果統(tǒng)計多管發(fā)酵法的結(jié)果是根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)陽性結(jié)果的數(shù)目,從MPN表中查得相應(yīng)的MPN指數(shù),來計算每升水中糞大腸菌群細(xì)菌的MPN值。MPN是“Most Probable Number”的縮寫,指zui大可能數(shù),它是根據(jù)統(tǒng)計學(xué)理論,估計水體中的菌群密度和衛(wèi)生質(zhì)量的一種方法,所以準(zhǔn)確判斷不同接種量發(fā)酵管的陽性數(shù)是非常重要的,否則將導(dǎo)致較大偏差。濾膜法的結(jié)果是計數(shù)濾膜上呈藍(lán)或藍(lán)綠色的菌落,來計算出每升水樣中的糞大腸菌群數(shù)。所以為便于計數(shù),減少誤差,理想的水樣體積是一片濾膜上生長20-60個糞大腸菌群菌落。

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