Roche熒光定量試劑盒


guige 50UL

主要用途  PCR/RT-PCR產(chǎn)品

貨號與規(guī)格 品名 價格 (CNY) 優(yōu)惠價
 

FastStart Universal SYBR Green Master （Rox）pkg of 2000 x 50 μL reactions 

1,521.22

980.00
 

FastStart Universal SYBR Green Master （Rox）pkg of 2000 x 50 μL reactions 

13,727.99

8500.00

Roche熒光定量試劑盒

產(chǎn)品描述

ROCHE - FastStart Universal SYBR Green Master （Rox）為即用型、2×濃度的反應混和液，該產(chǎn)品包含了基于SYBR Green I檢測模式的qPCR和兩步法qRT-PCR進行實時DNA檢測時所需的所有試劑(除了引物與模板)。該試劑內(nèi)含參比染料ROX，適用于所有需要ROX校正的實時熒光定量PCR平臺。

FastStart Universal SYBR Green Master(ROX)也可用于兩步法RT-PCR。在兩步法RT-PCR中，RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA是不在實時PCR儀器上進行的獨立于其它反應的步驟。利用cDNA 作為起始樣本材料來進行后續(xù)的擴增及在線監(jiān)測需根據(jù)實時PCR標準流程操作。我們建議您使用Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit 進行RNA的反轉(zhuǎn)錄，cDNA 合成的具體操作請參考相關說明書。

ROCHE - FastStart Universal SYBR Green Master （Rox）說明書點我。

產(chǎn)品使用方法
1 實驗前準備
實驗*反應條件(包括DNA模板和PCR引物濃度、孵育溫度和時間、循環(huán)次數(shù))應根據(jù)特異性模板/引物而異。
樣本準備
· 請使用純度、濃度經(jīng)優(yōu)化摸索且不含PCR抑制物的DNA模板(如，基因組學或質(zhì)粒DNA，cDNA)。為獲得高重復性的核酸分離產(chǎn)物，請使用以下試劑：
- MagNA Pure LC或MagNA Pure Compact系統(tǒng)結(jié)合系統(tǒng)配套的核酸分離試劑盒用于核酸自動分離。
- 手動分離請使用High Pure Nucleic Acid Isolation Kit。· 請使用至多250 ng基因組DNA或50 ng cDNA。
請將DNA模板儲存于PCR級別的水中或5 – 10 mM 的Tris/HCl(pH 7.5-8.0)中。由于EDTA與鎂離子會形成敖合物，故請避免將模板溶解于TE緩沖液。
引物：PCR引物的終濃度為0.1 – 0.4 μM。建議初次試驗時每種引物的濃度為0.3 μM。
注意：實驗中使用的引物對濃度相等。
PCR引物的設計決定了擴增子長度、熔解溫度、擴增效率及產(chǎn)量。引物設計同時也取決于PCR程序的選擇(兩步法與三步法)。
引物設計可通過實時PCR系統(tǒng)供應商(如，PrimerExpress)提供的相關設計程序
如果您想在后續(xù)實驗中用水解探針檢測您的實驗結(jié)果，請選擇熔解溫度(Tm)在+58~+60°C之間的引物。您也可以采用羅氏應用科學部通用探針庫提供的預測試的探針來進行驗證SYBR Green I檢測。與通用探針庫的探針相對應的PCR引物的設計。陰性對照
為了檢測DNA污染物，在陰性對照組中將DNA模板替換成PCR級別的水。
反應體積：FastStart Universal SYBR Green Master (ROX)適用于多種不同體積的反應體系，反應中使用的反應管/板及合適的反應液體積，請參考不同儀器供應商的建議。
內(nèi)參染料ROX
原則上，實時PCR系統(tǒng)(除LightCycler系統(tǒng)外)提供了兩種不同的檢測方法：
· 結(jié)合內(nèi)參染料(通常為ROX)的檢測來校正各管SYBR Green I熒光信號。
· 單獨檢測SYBR Green I熒光信號。
檢測方法的選擇取決于所用儀器(如，是否具有檢測內(nèi)參染料熒光信號的通道)及儀器光源(鹵素燈或激光)。
含ROX內(nèi)參染料的FastStart Universal SYBR Green Master被證實無需調(diào)整其ROX的濃度即可用于ABI儀器(ABI PRISM 7000 測序系統(tǒng)、ABI 7300 實時PCR 系統(tǒng)、ABI 7500 實時PCR 系統(tǒng)、ABI 7700 測序系統(tǒng)以及ABI PRISM 7900 HT 快速實時PCR系統(tǒng))，也可用于Stratagene Mx3000P QPCR 系統(tǒng)。
注意：如果您不使用實時PCR系統(tǒng)的參比通道或您的系統(tǒng)不配備參比通道，請選擇FastStart SYBR Green Master (without ROX)。
如果您使用Bio-Rad iCycler iQ5 實時PCR檢測系統(tǒng)，請選擇Universal SYBR Green Master (without ROX)，并參考Bio-Rad iCycler iQ5 實時PCR檢測系統(tǒng)指導手冊進行External Well Factor Plate步驟以檢測孔道因子。
產(chǎn)品優(yōu)勢：
1、 出眾的性能，特殊優(yōu)化的buffer：通用 ROX 染料 (FRET-ROX)、應用于任意一臺需要使用ROX校正染料的實時熒光定量PCR儀器上
2、 簡便的實用，適用于各種難擴增情況：可擴增500bp的片段、以及 GC-或 AT-富含區(qū)域
3、 高純度dNTPs：HPLC純化，耐50次以上的凍融 （性能穩(wěn)定性）
4、 預含dUTP，可進行尿嘧啶DNA糖苷酶（UDG）反應，去除擴增產(chǎn)物污染
5、 高檢測靈敏度和特異性：采用FastStart化學修飾的熱啟動技術，DNA聚合酶一旦經(jīng)過高溫激活，即獲得全部的活性

儲存條件

該產(chǎn)品在-15~-25°C條件下可穩(wěn)定存放至標簽上的有效期之前。若存放于+2~+8°C條件下，則可短期儲存（不超過1個月）。
注意：請將該產(chǎn)品避光保存。請避免將該產(chǎn)品反復凍融。
該反應液添加引物與模板后可在+15~+25°C及避光條件下穩(wěn)定儲存24小時。
運輸條件：干冰運輸。相關產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品貨號 產(chǎn)品包裝 強勢* 單價（元）/
反應（20ul）