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    ADAMTS13活性測(cè)定試劑盒

Cat#812

背景簡(jiǎn)介：

ADAMTS13又稱(chēng)vWF裂解蛋白酶，是一種鋅金屬蛋白酶，可裂解位于 vWF A2區(qū)Tyr(1605)-Met(1606)之間的超大型vWF多聚體（UL-vWF）。研究表明，低活性的ADAMTS13與血栓性血小板減少性紫癜（TTP）有關(guān)，TTP 是一種危及生命的血液病，其特點(diǎn)是血小板計(jì)數(shù)低、微血管血栓、紅細(xì)胞破碎、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和腎臟并發(fā)癥。ADAMTS13 活性水平低于正常的 5%，會(huì)導(dǎo)致血漿中 UL-vWF 多聚體的積累。UL-vWF 多聚體會(huì)與血小板上的受體結(jié)合，誘導(dǎo)血小板聚集，形成血管內(nèi)微小血栓。

先天性TTP是一種罕見(jiàn)的遺傳性疾病，由ADAMTS13基因突變引起，導(dǎo)致產(chǎn)生無(wú)功能的ADAMTS13蛋白。獲得型TTP 是一種自身免疫性疾病，由ADAMTS13的自身抗體抑制酶的活性引起。測(cè)量 ADAMTS13 活性水平有助于將 TTP 患者與溶血性尿毒癥（HUS）和特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)等其他血小板減少性疾病區(qū)分開(kāi)來(lái)。現(xiàn)有的 ADAMTS13 活性測(cè)量方法包括多聚體分析、膠原結(jié)合和 vWF 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，這些方法用時(shí)長(zhǎng)、操作困難且結(jié)果不穩(wěn)定。直到Kokame使用合成的 VWF73 肽基底物，能夠快速有效的檢測(cè)FRET。

檢測(cè)原理：

 ACTIFLUORT^M ADAMTS13是一種FRET檢測(cè)試劑盒，用于檢測(cè)人體血漿中ADAMTS13的活性。使用重組VWF86-ALEXA FRET底物對(duì)檸檬抗凝血漿樣本進(jìn)行 ADAMTS13 蛋白酶活性檢測(cè)。ADAMTS13對(duì)VWF86-ALEXA FRET底物中tyr/met殘基之間的蛋白水解，使ALEXA熒光脫鉤，從而導(dǎo)致熒光增加。使用熒光儀（Ex=485 nm; Em=535nm）在 37℃下監(jiān)測(cè)ADAMTS13裂解底物導(dǎo)致的熒光隨時(shí)間的增加（Vmax）。利用正常血漿和已知濃度的ADAMTS13構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。血漿中ADAMTS13的活性通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線的Vmax值插值計(jì)算確定。

產(chǎn)品應(yīng)用：

 ACTIFLUOR™ ADAMTS13 活性測(cè)定是一種熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET) 分析法，用于測(cè)定人體血漿中的 ADAMTS13活性。

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