LFB染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

LFB染色介紹：

勞克堅(jiān)牢藍(lán)(Luxol fast blue，簡(jiǎn)稱(chēng)LFB），是對(duì)皮膚組織神經(jīng)中髓鞘，腦，脊髓，（藍(lán)色，背景紅色）進(jìn)行染色。

LFB染色實(shí)驗(yàn)步驟（僅供參考）：

1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ10min-無(wú)水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。

2、染色：切片置于0.1% LFB染液60℃孵育過(guò)夜，自來(lái)水沖洗；

3、分化：切片放入70%乙醇中（無(wú)固定時(shí)間）；切片浸入0.05% *中，鏡下控制分色時(shí)間至分色*（可見(jiàn)灰質(zhì)部分顏色變淡）；如分化不好這兩步交替進(jìn)行幾次至鏡檢滿(mǎn)意，水洗；

4、伊紅復(fù)染：0.1%伊紅復(fù)染1min，水洗；

5、封片：電吹風(fēng)吹干或烘箱吹干；二甲苯透明數(shù)分鐘，中性樹(shù)膠封片。

6、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

染色結(jié)果：神經(jīng)髓鞘呈藍(lán)色；其他成分呈紅色。

注意事項(xiàng)：

1、染色前，固藍(lán)溶液需要預(yù)熱，染液溫度會(huì)對(duì)標(biāo)本著色強(qiáng)弱有一定影響。
2、70%的酒精和0.05%*分化可以反復(fù)進(jìn)行，直至灰質(zhì)變?yōu)闊o(wú)色或者淡藍(lán)色。
3、固藍(lán)染完冷卻從固藍(lán)拿出后，需要盡快分化，玻片不能長(zhǎng)時(shí)間放在水中也不能長(zhǎng)時(shí)間放在外面使組織干掉。在水中浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，固藍(lán)的顏色會(huì)掉，會(huì)導(dǎo)致染色特異性不明顯；組織干了，會(huì)導(dǎo)致再分化時(shí)，分化不均勻。

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