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线粒体呼吸链复合物III活性比色法定量检测试剂盒产品说明书
阅读：1424 发布时间：2016-6-21主要用途
我公司线粒体呼吸链复合物III（辅酶Q-细胞色素C还原酶）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用还原性合成辅酶Q同功类似物和特异性抑制剂，通过反应系统测定样品中细胞色素C还原后峰值的增高，即采用比色法测定样品中酶活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体样品（动物、人体、酵母）以及细胞或组织裂解悬液样品的辅酶Q-细胞色素C还原酶的特异性活性检测?？捎糜?strong>衰老、能量代谢、蛋白组学、病理身理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。
注意事项
- 本产品为21次操作（10个样本），包括1次背景对照测定
- 操作时，须戴手套
- 系统操作过程中，背景测定只需1次
- 线粒体样品检测前，须溶解；建议冻存融解（－70℃至37℃）循环3次
- 如果增强酶活检测，建议使用线粒体复合物待测样品预处理试剂盒－10342
- 每增加1个样品，增加反应工作液为：反应液（Reagent B）5微升＋稳定工作液5微升，以此类推。配制反应工作液时，须根据样本数量配制实际工作液容量
- 用户可以根据实际样品，计算缓冲液（Reagent A）、反应工作液和底物液（Reagent D）三者之和，混匀后，室温下静置10分钟，置于冰槽里等待检测
- 加入样品启动反应后3秒内即刻比色测定
- 分光光度计波长严格设置在550nm，误差10nm将不产生信号
- 测定可以持续2分钟
- 测定值由低到高变化，即2分钟测定读数高于0分钟测定读数，表明有酶活性
- 比色测定后，比色皿须清洗*
- 建议用户使用分光光度仪检测，总体系减半可以增加检测样本数
- 建议待测样本线粒体蛋白浓度为10微克/100微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量；注意计算公式的调整（本公司提供线粒体溶解试剂盒HL10018为后续的线粒体蛋白浓度测定的预处理试剂盒和 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒HL30030.1）
- 如果使用细胞或组织裂解悬液，则蛋白浓度为50微克/100微升
- 样品特异活性是指抗霉素敏感的辅酶Q－细胞色素C还原酶，去除其它干扰因素（例如复合物I/II/IV等）
- 线粒体呼吸链复合物III（辅酶Q－细胞色素C还原酶）单位活性定义为：在30℃，pH 7.5条件下，每分钟内能够氧化1微摩尔还原型泛醌（CoQH2）所需的酶量作为一个活性单位
- 本公司提供系列线粒体及其酶类技术产品
- 如：
- 线粒体呼吸链复合物II（琥珀酸－辅酶Q还原酶）活性定量检测试剂盒
- 线粒体呼吸链复合物II（琥珀酸－辅酶Q还原酶）活性定量检测试剂盒
- 线粒体呼吸链复合物IV（正铁细胞色素C－氧化还原酶）活性定量检测试剂盒
- 线粒体呼吸链复合物V（F0F1-ATP酶/ATP合成酶）活性定量检测试剂盒