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ELISA试剂盒的包被方法

阅读:1716          发布时间:2015-2-9

  目前做多的方式是采用pH9.6的碳酸盐缓冲液包被,4℃过液包被或者37℃包被2h,包被的适浓度随固相载体和包被物的性质变化,一般蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要明确针对特定包被抗原的适包被浓度需要通过实验来确定。

  聚本乙烯载体中加入定量的蛋白质包被液后,多数放在4℃冰箱过液,让固相表面充分吸附,或用37℃孵育2h也可以达到同样的吸附效果,但37℃包被2~3h与1h,两者后测得的吸光度值相差不显著。 蛋白质吸附于聚苯乙烯酶标板的动力学研究表明: 加入包被液后1MIN, 固相上便发生吸附作用,吸附量与蛋白质浓度, 包被时间有关。 当蛋白质浓度为5ug/mL时,包被60MIN出现明显吸附,12h后吸附量不再随时间延长而增加: 蛋白质浓度为10ug/mL 和20ug/mL时, 两者的吸附作用类似, 包被3min 便出现明显吸附, 6h后吸附*, 5min 的吸附量为6min的30%

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