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上海哈灵生物科技有限公司>技术文章>*培养基以及基础培养基的用途

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*培养基以及基础培养基的用途

阅读:1612          发布时间:2013-11-18

        用以培养细胞的*培养基是由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)而组成。期间虽然培养基的配方一直在改进(这也包括抗生素和抗有丝分裂剂等等),但是基础培养基的在培养基配方中依旧占据着为重要的地位。

 

        绝大多数的培养基都是建立在平衡盐溶液(BSS)的基础上的,再往其中添加氨基酸、维生素以及其它与血清中浓度相似的营养物质,这样就形成了初步也是基础的培养基。我们熟知的也是被广泛应用的培养基“Eearle`s MEM ”的混合物,其中就包含了13种必须氨基酸和8种维生素。而次于MEM的Ham`s F12 也包含了许多非必须氨基酸,含有的维生素的范围亦是很广阔,另外也含有常规无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。

 

        MEM和F12 这两种培养基各取1/2,就会形成神经生物学中通用的培养基“Dulbecco`s改良培养基——DMEM”,这种培养基现应用于快速生长的细胞,虽同MEM含有的营养成分相同,但其浓度高出2~4倍,令人惊讶。选择某种培养基,应当经过仔细考虑,首先应细致的了解培养基成分表,其次我们应知道在大多数情形下培养基都是有不足的。

 

        例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言是具有危害的,所以并非是佳选择,特别体现在如果神经元生长在缺乏胶质的环境中的时候。值得注意的F12中是含有硫酸亚铁,据报道称也是有神经毒效应,要注意使用。

 

        在所有这些培养基中,一般情况下谷氨酸是比其他氨基酸有更高的浓度的,这是由于它具有不稳定性以及它在许多细胞培养中会常用作碳源。另外对于神经元的培养我们会常常在基础培养基中会增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸(注:若培养基中这两种物质缺乏时)。对于MEM与F12要注意的是二者均是要用5%的CO2来平衡的,其中DMEM含更高浓度的NaCO3,所以要用10%的CO2来平衡,当然也可以在较低CO2浓度下使用,但效果差一些。不同基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的,但通常在原代培养中使用也能有出人意料的的结果,令人满意 。

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