日韩亚洲情Av无码,日韩亚洲AV无码精品影院,日韩人妻系列无码专区久久,亚洲无码日韩高清中文字幕

基本原則

熒光素標(biāo)記在相應(yīng)的抗體與相應(yīng)的抗原，直接反應(yīng)。簡(jiǎn)單，特異性高的優(yōu)點(diǎn)，非特異性熒光染色少。缺點(diǎn)是靈敏度低；每個(gè)檢查抗原要求熒光抗體的制備。免疫病理學(xué)檢查方法常用于細(xì)菌，病毒和其他快速檢查和活檢，皮膚活檢。

儀器和試劑

L磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）：0.01mol／，pH7.4

抗體溶液的熒光標(biāo)記物：0.01mol／L PBS，pH7.4稀釋

l緩沖甘油：純無(wú)熒光甘油9 + pH9.2 0.2m碳酸鹽緩沖液1例分析。

l漆三桶（用0.01mol／PBS，pH7.4 1500ml）

我覆蓋的搪瓷盒（一層紗布?jí)|鋪浸泡）

熒光顯微鏡

我滑架

L濾波器

我37℃溫箱等。

實(shí)驗(yàn)程序

1滴0.01 mol/L PBS，pH7.4的檢測(cè)樣張，10min后試樣的丟棄，保持一定的濕度。

熒光標(biāo)記的2抗體溶液加入適當(dāng)稀釋，并*覆蓋件，覆蓋釉質(zhì)瓷箱下，保溫時(shí)間（參考：30min）。

3拆下滑動(dòng)，滑架，先用0.01mol/L，pH7.4 PBS沖洗，然后根據(jù)0.01mol/L秩序，pH7.4 PBS三缸浸泡3-5分鐘，每個(gè)氣缸，不時(shí)振蕩。

4刪除幻燈片，用濾紙吸去多余的水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，布滿了。

5立即用熒光顯微鏡。具體的觀察到的熒光強(qiáng)度，一般可用“+”的意思：

（-）無(wú)熒光；熒光（±）可疑很弱；（+）熒光較弱，但清晰可見；（2+）熒光（+ + +——+ + + +）熒光閃閃發(fā)光。檢測(cè)到特異性熒光染色強(qiáng)度試件是“+”，以及各種控制顯示器（+）或（-），可以被看作是積極的。

注意事項(xiàng)

1對(duì)熒光標(biāo)記的抗體稀釋，以確保抗體蛋白有一定的濃度，一般不應(yīng)超過(guò)1:20稀釋，低濃度的熒光抗體，導(dǎo)致太弱，觀察。

2染色溫度和時(shí)間需要根據(jù)樣品和抗原不同而異，染色時(shí)間可以從10分鐘到30個(gè)小時(shí)，一般民有足夠的。染色采用室溫溫度（25℃），高于37℃可以提高染色效果，但不耐熱抗原（如日本腦炎病毒）可以用來(lái)在0-2℃溫度低，延長(zhǎng)染色時(shí)間。低溫染色過(guò)液是37℃30分鐘效果好的多。

3為了保證熒光染色的正確性，*次測(cè)試設(shè)置下列控制，排除干擾的一些非特異性熒光染色。

（1）樣品的熒光控制：1-2 0.01 mol/L PBS pH7.4的標(biāo)本。

（2）比控制（抑制）：與特定的抗體未標(biāo)記的樣本，再加上熒光標(biāo)記的特異性抗體。

（3）陽(yáng)性對(duì)照：已知的陽(yáng)性標(biāo)本用特異性熒光抗體。

如果樣品熒光控制和具體控制無(wú)熒光或熒光弱，積極控制和檢測(cè)的標(biāo)本顯示很強(qiáng)的熒光，特異性陽(yáng)性染色。

4一般標(biāo)本比高壓汞燈下照射3min，熒光減弱，熒光在的觀察標(biāo)本染色，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，其熒光強(qiáng)度降低。