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ELISA試劑盒原理—雞血液中IgG含量測(cè)量實(shí)驗(yàn)步驟
閱讀:1473 發(fā)布時(shí)間:2013-8-9ELISA試劑盒原理—雞血液中IgG含量測(cè)量實(shí)驗(yàn)步驟
步驟:
1包被:用包被緩沖液稀釋待測(cè)雞血(能夠稀釋成不同的濃度,如1:100,1:1000,1:10000),包被液稀釋雞IgG(要做背比稀釋),100ul/孔,4度過液。 ELISA試劑盒原理- 上海哈靈生物科技有限公司
2封閉:3%BSA的PBST,100ul/孔,4度過ye或37度1h。
3一抗:用含1%BSA的PBST稀釋兔抗IgG(比例依照抗體的說明書)100ul/孔,37度1h
若是這個(gè)抗體應(yīng)該是HRP符號(hào)的。可以直接加底物反應(yīng),若不是還需要再加一步孵育HRP符號(hào)的抗兔抗體。
4底物顯色:加TMB顯色液(這個(gè)公司都有賣的)100ul/孔。避光10-15分鐘。
5停止:2M硫酸終止。
6酶標(biāo)儀檢測(cè)。
后根據(jù)規(guī)范品作規(guī)范曲線,樣品的OD帶入規(guī)范曲線計(jì)算濃度。