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细胞分离试剂盒的挑选
阅读：1418 发布时间：2013-7-23怎么挑选适宜的细胞分离试剂盒
细胞分离试剂盒的作业原理主要有两种——正向挑选和负向挑选。正向挑选的试剂盒，运用与目标细胞直接的抗体这种方法来进行捕获。通常情况下，这种抗体与磁珠相连，就可以使用磁铁将悬液中的抗体-磁珠-细胞复合物提取出来，再经过二抗将磁珠与目标细胞分隔。这种方法就是正向挑选。负向挑选的试剂盒也选用相似的抗体包被磁珠，不过这种试剂盒是通过去掉样品中的非目的细胞来直接捕获目的细胞。
从样品中分离提纯同种细胞，是许多低端运用的重要一步，分离得到的细胞能够用于蛋白分离、生化剖析、?细胞计数、?基因判定、细胞计数、生化剖析、等研讨。一款适宜的细胞分离试剂盒能够说是试验成功的保证，由于只要取得正确的细胞，作用于结果的的剖析成果才能够。当前，市场上有多种多样的分离试剂盒可供挑选，它们的首要差异在于分离办法和挑选象征。
这两种细胞分离试剂盒怎么取舍，首要取决于目标细胞的外表是不是具有特异性强的挑选象征。这样的挑选象征能够完成特异性的捕获，防止所取得的细胞被非目标细胞污染。若是你的目标细胞刚好具有这样的挑选象征，那么正向挑选的细胞分离试剂盒即是佳挑选。但若是目标细胞并不具有特异性强的挑选象征，那咱们佳仍是选用负向挑选的细胞分离试剂盒。
挑选象征的断定
PubMed and other databases through literature, we are usually able to determine the expression of the target cells selected symbol. If no suitable literature since the appearance of a symbol, we can also use the target cell's DNA sequence BLAST search.BLAST查找成果会显现，目标细胞上能够表达的外表象征，在此基础上能够选择用于捕获的细胞外表蛋白。举例来说，对一个T细胞进行BLAST查找，成果会显现该细胞是不是表达CD4或CD8。在得知目标细胞表达CD4之后，咱们能够先对样品进行一个免疫试验（如ELISA），以查验BLAST查找的成果。一旦证明目标细胞确实表达CD4，咱们就能够用相应试剂盒来挑选CD4阳性的T细胞。
通常流程
一个用于分离CD4阳性T细胞的试剂盒，它的操作流程有以下几步。首先，将样品与anti-CD4抗体包被的磁珠一同孵育，使抗体与CD4+ T细胞。然后洗去不需要的非目标细胞（即不表达CD4的细胞），留下磁珠-抗体-细胞复合物。将以上复合物与能anti-CD4抗体的二抗一同孵育，二抗就会代替CD4+T细胞，构成磁珠-抗体-二抗复合物。咱们能够用磁铁去掉这种磁珠-抗体-二抗复合物，而一切的CD4+细胞留在上清中。终，就能完成实验了。