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大鼠白介素ELISA试剂盒操作注意事项
阅读：698 发布时间：2024-11-6大鼠白介素ELISA试剂盒操作注意事项
个人防护
手套和防护：试剂盒中的终止液是酸性的，操作时请记得戴手套，避免接触皮肤和眼睛。如果不小心接触到，立即用大量清水冲洗。
试剂保存
温度控制：试剂盒要放在2~8℃的冰箱里保存，并在有效期内使用。
标准品保存：用不完的标准品，要么丢掉，要么分装后放在-20～-80℃的冰箱里。
试剂回温
室温恢复：使用前，让试剂在室温下恢复30分钟，并确保所有成分和样品都充分混匀。
避免污染
一次性用品：实验中使用一次性EP管、枪头、封板膜和干净的塑料容器，以避免交叉污染。
操作一致性
标准操作：实验中，对标准品和样本进行复孔检测，并保持试剂加入顺序一致。每次检测都需要做标准曲线。
洗涤清楚
全部清洗：洗板时去除残留液体，以获得最佳结果。洗完后立即进行下一步，不要让微孔板干掉。
避免气泡
轻柔混匀：在重溶或混匀标准品时，要轻柔操作，避免产生气泡。
显色和终止
显色底物：显色底物添加前应无色，并避光保存。
终止液顺序：终止液的添加顺序应与显色底物相同。添加后，底物颜色应从蓝变黄。
样本处理
去除沉淀：去除样本中可见的沉淀，避免使用溶血或高血脂样本，以免影响结果。
样本稀释
稀释检测：如果样本中靶标物浓度过高，需要适当稀释后再检测。正式实验前，先做预实验确定稀释倍数。
样本稀释小贴士
为什么要稀释样本？
如果样本中目标物质的浓度太高，超过了测试范围，就需要稀释，以便准确测量。
稀释到什么程度？
稀释后，样本信号应在标准曲线中间范围内，以确保数据准确。
稀释的小技巧
大倍数稀释时，建议分步进行，比如先稀释10倍，再从这个基础上稀释20倍，得到准确的200倍稀释液。
取多少样本？
取样时，至少5微升，以减少操作误差。
预实验很重要
正式实验前，先做小实验，确定样本需要稀释的倍数。
稀释操作要规范
特别是大倍数稀释时，要规范操作，减少误差。
稀释后的样本怎么保存？
稀释后的样本要妥善保存，避免反复冻融，防止蛋白质降解。建议分装后放在-20℃或-70℃的冰箱里。
样本预处理
不同类型的样本需要不同的预处理方法，合适的预处理是确保实验准确的关键。
稀释液的选择
稀释样本时，最好用和标准品一样的稀释液，以保持实验条件一致。