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冰冻切片弹性纤维伟郝夫范吉森染色试剂盒产品说明书
阅读：1126 发布时间：2023-3-8冰冻切片弹性纤维（ELASTIC）伟郝夫范吉森（Verhoeff-Van Gieson）染色试剂是一种旨在使用标准化的
化学脱蜡方法和伟郝夫（Verhoeff）苏木素以及媒染剂氯化铁，分析和区分冰冻组织切片中的弹性纤维的
而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。适用于皮肤、肾脏、动脉组织等
染色。广泛运用于动脉硬化、肺气肿、血管病变和衰老等引起的弹性纤维异常等研究。产品严格无菌，即
到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。 技术背景
弹性纤维（elastic fiber），又称为黄色纤维（yellow fiber），是固有结缔组织（Connective tissue proper）细胞
外基质的成分之一，由平滑肌细胞和成纤维细胞产生弹力蛋白质（elastin）、原纤维蛋白（fibrillin；FBN）
等构成。弹性纤维具有可伸展性。存在于皮肤、肺、动脉、静脉、弹力软骨、牙周韧带（periodontal ligament）、
脂肪组织中。弹性纤维缺失导致皮肤松弛症（cutis laxa）、威廉姆斯综合征（Williams Syndrome）等疾病。
基于伟郝夫范吉森（Verhoeff-Van Gieson；VVG）的发明，应用递减性（regressive）苏木素选择性染色弹
性纤维，通过媒染剂氯化铁，帮助区别其它包括肌肉、胶原纤维、纤维蛋白（fibrin）等组织成分。伟郝夫
范吉森方法操作简便，凸显弹性纤维，难以细致区分其它组织成分。 产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
固着液（Reagent B） 毫升
染色液（Reagent C） 毫升
媒染液（Reagent D） 毫升
稳定液（Reagent E） 毫升
复染液（Reagent F） 毫升
产品说明书 1 份
保存方式
保存在 4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意安全；有效保证 3 月
用户自备
小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器
中性树脂：用于切片封片
光学显微镜：用于切片染色后观察分析
实验步骤
一、 样品固着处理
1． 准备好 5 微米厚的冰冻切片
2． 小心加上 xx 微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
3． 室温下孵育 2 分钟
4． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
5． 小心加上 xx 微升固着液（Reagent B）在切片上，铺满整个切片样品表面
6． 室温下孵育 5 分钟
7． 小心移去切片上的固着液（Reagent B）
8． 小心加上 xx 微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
9． 室温下孵育 2 分钟
10．小心移去切片上的清理液（Reagent A）
二、 样本染色处理
1． 小心加入 xx 微升染色液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面
2． 室温下孵育 60 分钟，避免光照（注意：组织切片呈现黑色）
3． 小心移去染色液（Reagent C）
4． 室温下，小心将切片置入 xx 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分钟
5． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
6． 小心加入 xx 微升媒染液（Reagent D）在切片上，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育 2 分钟，直至肉眼或显微镜下观察背景呈现灰色，避免光照（注意：避免过度去色）
8． 小心移去媒染液（Reagent D）
9． 室温下，小心将切片置入 x 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分钟
10．小心移去切片上的清理液（Reagent A）
11．小心加入 xx 微升稳定液（Reagent E）在切片上，铺满整个切片样品表面
12．室温下孵育 1 分钟
13．小心移去稳定液（Reagent E）
14．室温下，小心将切片置入 xx 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分钟
15．小心移去切片上的清理液（Reagent A）
16．小心加入 xx 微升复染液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
17．室温下孵育 5 分钟
18．小心移去复染液（Reagent F）
19．室温下，小心将切片置入 xx 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分钟
20．小心移去切片上的清理液（Reagent A）
21．（选择步骤）透明澄清处理
22．放上盖玻片或封片（中性树脂）
23．即刻在一般光学显微镜下观察：
2
注意事项
1． 本产品为 50 次操作
2． 操作时，须戴手套
3． 试剂具有腐蚀性，注意操作安全
4． 建议使用玻璃染色缸
5． 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干
6． 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面
7． 整个操作，在避光状态下进行
8． 染色完成后，即刻进行光学显微镜观察
9． 样品染色后保存，避免光照
10．本公司提供系列特定组织染色试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定显色清晰