CR,BIM鹅钙结合蛋白elisa试剂盒技术指导

l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中鹅钙结合蛋白（CR）的含量。

l 有效期：6个月

l 保存条件：2-8℃

l 本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被鹅钙结合蛋白（CR）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的鹅钙结合蛋白（CR）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

二、“CR,BIM鹅钙结合蛋白elisa试剂盒技术指导”应用领域

本公司产品试用与各研究单位、学?？蒲惺笛?/span>

三、“”操作流程（具体请参照说明书）

① 加抗体包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干

② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干

③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干

④ 加底物液　→ 37℃ 15分钟，加终止液

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值

四、常见问题

实验中zui可能出现问题       

一、所有孔未显色？

分析原因：      

1、微孔加入抗体后，洗板不*，微孔中存在游离的抗体。          

2、用错试剂。          

3、在操作中忘记加酶或抗体。     

 解决办法：            

1、检查洗板器械，比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。          

2、在加样前，要看清瓶签。          

3、严格按说明书操作步骤进行实验，确保每步都到位。          

二、所有孔显色偏低？

分析原因：    

1、微孔加入抗体后，洗板不*，微孔中存在游离的抗体。          

2、洗板不干净。          

3、抗体污染了酶结合物等其它试剂。          

4、温度没达到要求。          

5、每孔加入的试剂量低于说明书要求量。      

解决办法：     

1、手工加蒸馏水洗板时，要避免吸头接触微孔，常更换新的蒸馏水。    

2、洗板时要确保每孔都注满蒸馏水（约400ul），且至少洗板五次。      

3、严格按说明书要求操作，每次取样要更换吸头。      

4、控制孵育温度在25℃。       

5、加样器吸头安放牢固避免吸样不足，加样时务必将吸头内液体打尽。

五、储存方式

试剂盒在4℃下存放不要冻结,4℃保存，有效期六个月，客户应要求供应商，提供批次试剂盒