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IL-1β,BIM鸡白细胞介素1βelisa试剂盒原理

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  • 型号
  • 品牌 BIM
  • 厂商性质 生产商
  • 所在地 上海市

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更新时间:2017-08-01 11:07:49浏览次数:702

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产品简介

IL-1β,BIM鸡白细胞介素1βelisa试剂盒原理用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中鸡白细胞介素1β(IL-1β)的含量。

详细介绍

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中鸡白细胞介素1βIL-1β)的含量。

有效期:6个月

保存条件:2-8℃

本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被鸡白细胞介素1β(IL-1β)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡白细胞介素1β(IL-1β)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

 

IL-1β,BIM鸡白细胞介素1βelisa试剂盒原理主要优点

 1.高效、灵敏、特异的抗体;

 2. 稳定的重复性和可靠性;

 3. 吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;

 4. 适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;

 5. zui大限度的节省实验经费。

 

IL-1β,BIM鸡白细胞介素1βelisa试剂盒原理样本要求:

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含 NaN3 的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

IL-1β,BIM鸡白细胞介素1βelisa试剂盒原理操作步骤

1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7.温育:操作同 3。

8.洗涤:操作同 5。

9.显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.

10.终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

注意事项

1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物请避光保存。

6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm

7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须注意安全。

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