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大鼠ELISA试剂盒(肿瘤坏死因子)中文说明书

·本试剂仅供研究使用  
·试验原理：
    IFN-Y试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知IFN-Y浓度的标准品、未知浓度的样品 加入微孔酶标板内进行检测。先将IFN-Y和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IFN-Y的浓度呈比例关系。_________________________________________________________________________________
·自备材料：
  1.蒸馏水。
  2.加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
  3.振荡器及磁力搅拌器等。

·样品收集、处理及保存方法：
  1.血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
  2.血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
  3.细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。
  5.保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

·安全性：
  1.避免直接接触终止液和底物A、B，一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
  2.实难中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
  3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
 
·试剂盒性能：
  1.灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
  2.特异性：不与其它细胞因子反应。
  3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
 
·结果判断与分析：
  1.仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
  2.以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的IFN-Y标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的IFN-Y含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
  3.检测值范围：0-400pg/ml
  4.敏感度：1.0pg/ml