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细胞培养需要哪些添加物及作用说明
阅读：175 发布时间：2025-6-18细胞培养添加物是优化细胞生长环境的关键组分，其作用涵盖营养供给、pH 稳定及代谢调控等。以下是主要添加物的分类说明：
一、基础营养添加物
?L-谷氨酰胺?
?作用?：核心能量来源，参与蛋白质合成和核酸代谢36。
?缺陷?：水溶液中自发降解（4℃存放1周降解50%），产生有毒氨类物质36。
?替代方案?：
?GlutaMAX-I?（L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）：通过肽酶缓慢释放谷氨酰胺，稳定性高，避免氨毒性。
?D-葡萄糖?
?作用?：主要碳源，支持能量代谢。
?类型差异?：
低糖型（1 g/L）：适合贴壁细胞（如成纤维细胞）。
高糖型（4.5 g/L）：适用于快速增殖细胞（如CHO细胞、杂交瘤细胞）。
?丙酮酸钠?
?作用?：替代碳源，在葡萄糖不足时维持能量供应。
二、缓冲系统与pH稳定剂
?碳酸氢钠?
?作用?：与CO?形成缓冲对，维持pH 7.2–7.4。
?使用条件?：
高浓度（1.5–3.7 g/L）：需5–10% CO?环境。
低浓度（0.35 g/L）：无需CO?培养箱。
?HEPES缓冲剂?
?作用?：非CO?依赖型缓冲剂，防止pH波动（尤其适用于克隆化培养）。
?优势?：无细胞毒性，长期维持pH稳定。
?酚红指示剂?
?作用?：pH可视化指示（红：中性；黄：酸性；紫：碱性）。
?局限性?：
干扰流式细胞检测；
模拟雌激素活性，影响激素敏感细胞（建议无血清培养时去除）。
三、血清及替代成分
?胎牛血清（FBS）?
?作用?：提供生长因子、激素及黏附蛋白，促进细胞增殖。
?添加比例?：常规培养需10%浓度。
?无血清替代添加剂?
?成分?：特定生长因子（如EGF、胰岛素）、载体蛋白（如转铁蛋白）及微量元素。
?优势?：成分明确，减少批次差异，避免病毒污染风险。
四、其他功能添加物
?维生素与微量元素?
?B族维生素?：辅酶因子，支持代谢（如B?参与糖代谢脱羧）。
?微量元素?（铁、锌等）：
铁：氧运输与呼吸链关键组分；
锌：调节酶活性及细胞增殖。
?抗生素?
?常用组合?：青霉素-链霉素（双抗），预防细菌污染。
?注意?：长期使用可能掩盖低水平污染，干扰实验结果。
五、应用选择建议
注：实际应用中需根据细胞特性（如代谢需求、激素敏感性）及实验目的（如生产vs.研究）优化添加物组合。