聯系電話
上海北諾生物科技有限公司
中級會員·14年
- 聯系人：
- 周經理 劉經理
- 電話：
- 021-57730393
- 手機：
- 15800960770
- 傳真：
- 86-021-61496710
- 地址：
- 上海市徐匯區(qū)宜山路520號中華門大廈18樓D座
- 個性化：
- www.bnbiotech.com
掃一掃訪問手機商鋪
實驗步驟
1. LB 培養(yǎng)基
Tryptone | 10 g |
Yeast Extract | 5 g |
NaCl | 10 g |
加水至 1000 mL（pH 7.2，固體培養(yǎng)基加 1.8% 瓊脂粉）。
2. LB 抗性篩選培養(yǎng)基
待滅菌后的 LB 固體培養(yǎng)基溫度降至 50℃左右，加入抗生素儲存液至終濃度 50 μg/mL，即每毫升培養(yǎng)基加抗生素儲存液 1 μL，搖勻后，倒平板。
液體 LB 抗性篩選培養(yǎng)基，在*冷卻后加入抗生素，加入的量與固體培養(yǎng)基相同。
3. LB/Amp/IPTG/X-gal 培養(yǎng)基
在含 100 μg/mL Amp 的 LB 瓊脂平板上加入 40 μL X-gal 貯存液和 40 μL IPTG 溶液，用無菌玻璃涂布器把溶液均勻涂布于整個平板表面，超凈工作臺上吹干后備用。
4. SOC 液體培養(yǎng)基
Tryptone | 20 g |
Yeast Extract | 5 g |
NaCl | 0.5 g |
加入 950 mL 水，*溶解后加入 250 mmol/L 的 KCl 溶液 10 mL，用NaOH 溶液（5 mmol/L）調節(jié) pH 值至 7.0，雙蒸水定容至 1000 mL 后高壓滅菌。滅菌后降溫至 60℃以下，加入 7.2 mL 50% 葡萄糖溶液。使用前加入5 mL 經滅菌的 2 mol/L 的 MgCl2 溶液。
