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腹瀉性貝類毒素檢測試劑盒檢測原理
閱讀：255 發(fā)布時間：2022-11-1
腹瀉性貝類毒素檢測試劑盒直接競爭性酶聯(lián)免疫原理檢測樣品中的岡田酸。微孔中包被有羊抗兔岡田酸抗體（二抗）。標(biāo)準(zhǔn)品/樣品中的岡田酸與岡田酸酶標(biāo)物競爭岡田酸抗體上的結(jié)合位點，加入包被二抗的微孔中后，岡田酸抗體與二抗結(jié)合。孵育后洗滌微孔。然后加入底物試劑，與岡田酸酶標(biāo)物發(fā)生反應(yīng)，使溶液變?yōu)樗{(lán)色，加入終止液后，溶液由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在450nm處測量吸光值，將未知樣品的吸光值與標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值相比，即可得到樣品中岡田酸的濃度。吸光值與樣品中岡田酸的濃度成負(fù)相關(guān)。
利用萃取液通過均質(zhì)及振蕩的方式提取樣品中的腹瀉性貝類毒素，再用緩沖液稀釋，然后進(jìn)行免疫測定。先將酶標(biāo)記物加入到微孔中，再加入標(biāo)準(zhǔn)及樣品，然后加入抗體進(jìn)行反應(yīng)。孵育30分鐘后洗掉小孔中所有沒有結(jié)合的分子。加入無色的底物溶液，培養(yǎng)30分鐘，所有結(jié)合的酶標(biāo)記物使底物轉(zhuǎn)化成藍(lán)色物質(zhì)。加入停止液然后讀取吸光度值，將未知濃度樣品與標(biāo)準(zhǔn)吸光度值進(jìn)行比較，就可以得到樣品中腹瀉性貝類毒素的濃度值。
腹瀉性貝類毒素檢測試劑盒檢測原理：
測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，微孔板包被有針對腹瀉性毒素（DSP）抗體的捕捉抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)或樣品溶液及腹瀉性毒素（DSP）酶標(biāo)記物，游離腹瀉性毒素（DSP）與腹瀉性毒素（DSP）酶標(biāo)記物競爭腹瀉性毒素（DSP）抗體，同時腹瀉性毒素（DSP）抗體與捕捉抗體連接。沒有結(jié)合的酶標(biāo)記物在洗滌步驟中被除去。將底物和發(fā)色劑加入到孔中并且孵育。結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)停止液后使顏色改變。在450nm測量，吸光度與樣品中的濃度成反比。