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东曹(上海)生物科技有限公司

关于常见色谱柱的认识误区(一)

时间:2021-3-26 阅读:2779
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   色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成,是装填有固定相用以分离混合组分的柱管,多为金属或玻璃制作,有直管形、盘管形、U形管等形状。色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类,液相色谱通常均采用填充柱,色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。
  误区1、空气会*损坏一根HPLC色谱柱
  当色谱柱不与色谱仪连接的时候,用户需确保色谱柱被紧紧地密封。事实上,实际的应用中是,即使柱的端部进入了少量的空气也不要紧。因为当你将色谱柱连接到色谱仪上使用时,在系统初始加压阶段,在很短的时间内空气就会被溶剂冲刷掉。所以,不要因为色谱柱进入了空气而认定色谱柱已被损坏。
  误区2、所有的C18(L1)色谱柱都是一样的
  由于C18色谱柱是一种广泛应用的色谱柱,故该系统将其称为“L1”。事实证明这个系统是不可靠的,是一个令人困惑的系统。
  因为每种商品化的C18色谱柱,虽然同样是选用硅胶作为基体,但各自都有自己特定的填料键合合成工艺,因此色谱性能也不相同。
  比如两种C18柱表现的色谱性能不同,后者C18固定相的键合比例大于前者。较低的固定相键合比率,表面未反应的硅醇基较多,有时混合保留机理起主要作用。
  误区3、反相色谱柱不可以使用纯水相
  这个误解其实是起源于有些用户在使用低有机溶剂含量或者纯水作为反相色谱柱的流动相时,发生了俗称相塌陷的现象,所以大家就认为反相色谱柱不可以使用纯水相。
  然而,事实上市售的反相色谱柱(如极性嵌入和极性封端柱)都是具有水浸润性的,其表面特性是允许使用纯水的,而不会导致塌陷或者保留时间移位。

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