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西安瑞禧生物科技有限公司

-靶向偶聯(lián)物-修飾PAMAM-D的制備

時(shí)間:2022-2-17閱讀:244

靶向性差及原性相互制約、、靶向的載體成為關(guān)鍵問題。采用如脂質(zhì)體、殼聚糖、聚乙烯亞胺(PEI)、多聚賴氨酸(PLL)及PAMAM-D等,其中PAMAM-D作為一種人工的納米分子聚合物,是具應(yīng)用的載體之一。

 

PAMAM-D的主要有無原性;保護(hù)目的不受血漿及組織中補(bǔ)體及的破壞,可由;易與特異性靶向分子偶聯(lián);與的其它非載體如PEI及PLL等相比,分子大小易控制

 

對(duì)于修飾的PAMAM-D(folate-PAMAM-D)靶向不多,修飾G5-PAMAM-DG5-PAMAM-D-fol)作為載體在體外將pcDNA3-tk質(zhì)粒導(dǎo)入PC-3和LNCaP中,再給予前體GCV,考察其載體的可行性。

RT-PCR檢測(cè)HSV-TK在12孔培養(yǎng)板上設(shè)實(shí)驗(yàn)組、陽性對(duì)照組及陰性對(duì)照組。PC-3、LNCaP融合,移去培養(yǎng)基,用溫?zé)岬腜BS溶液洗滌后,用無血清培養(yǎng)基以G5-PAMAM-D-fol:peDNA3-tk質(zhì)量比為3:1和G5-PAMAM-D:pcDNA3-tk質(zhì)量比為3:1及pcDNA3-tk 1μg分別轉(zhuǎn)染。4~6h后換成有血清培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。轉(zhuǎn)染24h后提取RNA。

 

結(jié)論:修飾的G5-PAMAM-D能夠在體外將組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入并表達(dá)HSV-TK,其作為載體靶向性,為將其應(yīng)用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究了的基礎(chǔ)。在正常下,PAMAM-D因氨基端質(zhì)子化而帶上正電荷,從而可以與帶負(fù)電的DNA相結(jié)合,形成納米尺寸的聚電解質(zhì)復(fù)合物,該復(fù)合物具有很的穩(wěn)定性和溶解性。

 

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