详细介绍
产品分类:碳水染色
储存条件:4℃,避光,12个月
用途:又称高铁二胺-阿利新蓝染色液,可以染色酸性黏蛋白、蛋白多糖、透明质酸等物质,可以区分硫黏蛋白和蛋白多糖。
注意事项:主要由高铁二胺溶液,Alcian 染色液等组成。染色结果为:酸性黏蛋白(硫酸化酸性黏液物质)呈棕紫色至棕黑色羧基化酸性黏液物质(蛋白多糖、透明质酸)呈蓝色,细胞核呈红色。
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
黏液HID-AB染色液 | 3×25ml | FS-R6843 |
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
兔耳草(标准品) Coptisine chloride三聚抗体包装25g
菟丝子(南方菟丝)(标准品) Lycorine chloride磷化雷帕霉靶蛋白抗体包装5g
蜕皮激(标准品) Betaine hydrochloride黑皮质-1受体抗体包装1g
脱落(标准品) Berbamine hydrochloride胃动抗体包装25g
脱氢齿孔 Leonurine hydrochloride甘露聚糖结合凝集抗体包装5g
脱氢紫堇碱;去氢紫堇碱(标准品) Myricetrin膜相关环指蛋白11抗体包装100g
脱内酯(标准品) Tectochrysin结核分枝杆菌Ag85B抗体包装25g
脱内酯琥珀半酯(标准品) Senkyunolide A磷化微管相关蛋白4抗体包装5g
脱羊藿(标准品) Oxysophocarpine磷化微管相关蛋白4抗体包装100g
脱氧熊果苷(标准品) Belinostat (PXD101)人痘带状疱疹病gE蛋白抗体包装25g
脱氧野尻霉(标准品) Oxypeucedanin黑色瘤相关抗原G1/肝癌相关蛋白4抗体包装25g
拓扑替康盐盐(标准品) Crotaline;Monocrotaline黑色瘤相关抗原B6抗体包装5g
瓦松(标准品) Scularin黑色瘤相关抗原C2抗体包装1g
万丈深(标准品) Scularein黑色瘤抗原样基因2抗体包装25g
万丈深(绿茎还阳参)(标准品) 8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester黑色瘤相关抗原C1抗体包装5g
尖镰孢古巴专化型(香蕉枯萎病菌)Fusarium│oxysporum 质量规格:纯度≥99.0%,BR,可用于培养巨噬移动抑制因子试剂盒橙黄决明-6-葡萄糖苷;
: 387资源名称: 赭褐链霉菌 质量规格:>99%,BR巨噬炎性蛋白5试剂盒次大风子;Hydnocarpin
中华单顶孢Monacrosporium│sinense 质量规格:含量测定巨噬炎性蛋白3β试剂盒醋棉;Gossypol-acetic
黏液HID-AB染色液TSLP(Ret) 大鼠胸腺基质淋巴细胞生成su规格: 48T
KGF 大鼠角蛋白生长因子规格: 48T
NGF 大鼠神经生长因子规格: 48T
leptin 大鼠瘦su规格: 48T
Lymphotactin 大鼠淋巴细胞趋化因子规格: 48T