详细介绍
商品介绍:
测定意义: 超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。 测定原理: AP-TEMED系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-与对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与530nm的吸光值呈负相关。 需自备的仪器和用品: 天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS632179 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹ń┨寤╩l):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑兆橹柿浚╣):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提?。喊凑兆橹柿浚╣):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4?!鰽测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)英文名:8-OHdG ELISA Kit1号染色体开放阅读框194抗体包装1g
70kDa热休克蛋白8(HSPA8)英文名:HSPA8 ELISA Kit1号染色体开放阅读框198抗体包装25g
70kDa热休克蛋白5(HSPA5)英文名:HSPA5 ELISA Kit1号染色体开放阅读框21抗体包装5g
70kDa热休克蛋白1A(HSPA1A)英文名:HSPA1A ELISA Kit1号染色体开放阅读框216抗体包装1g
60kD热休克蛋白(HSPD1)英文名:HSPD1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框43抗体包装25g
5羟色胺转运蛋白(SERT)英文名:SERT ELISA Kit1号染色体开放阅读框50抗体包装5g
5-羟色胺(5-HT)英文名:5-HT ELISA Kit1号染色体开放阅读框49抗体包装1g
5-羟基乙(5-HIAA)英文名:5-HIAA ELISA Kit1号染色体开放阅读框53抗体包装5g
50kDa核孔蛋白(NUP50)英文名:NUP50 ELISA Kit1号染色体开放阅读框54抗体包装1ml
27kDa热休克蛋白(HSPB1)英文名:HSPB1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框55抗体包装5g
25-羟基维生D3(HVD3)英文名:HVD3 ELISA Kit1号染色体开放阅读框56抗体包装100g
25kDa突触关联蛋白(SNAP25)英文名:SNAP25 ELISA Kit1号染色体开放阅读框65抗体包装25g
210kDa核孔蛋白(NUP210)英文名:NUP210 ELISA Kit1号染色体开放阅读框64抗体包装100g
20S-蛋白体(20S-PSM)英文名:20S-PSM ELISA Kit1号染色体开放阅读框69抗体包装25g
2',5'-寡腺苷合成1(OAS1)英文名:OAS1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框77抗体包装500g
马氏副球菌Paracoccus│marcusii 质量规格:>99%,BR,三合物胰脂肪试剂盒异槲皮苷;Isoquercitrin
海假交替单胞菌Pseudoalteromonas│marina 质量规格:HPLC>98%,标准品胰抑制试剂盒异鼠李-3-O-新;Isorha
结核分枝杆菌Mycobacterium│tuberculosis 质量规格:>99%,BR胰腺癌标志物CA242 原苏木B;Protosappanin
超氧阴离子清除能力测试盒50管/48样枯斑拟盘多毛孢 3--4-甲酰苯酸,95%磷酸二酯2Elisa
硬水黄杆 1-氟吡啶四氟酸盐过氧化物Elisa
热纤梭* ,4,6-基吡啶三氟磺酸盐RecQ解旋样蛋白5Elisa
肺形侧耳 (R)-3-氨基四盐酸盐载脂蛋白AElisa
纤维链霉 乙二二硫代缩氨基脲脂蛋白AElisa
茄链格孢 N-Boc-L-环己基甘氨表皮调节Elisa
丛毛单胞 1-甲基吲唑-4-羧酸Derlin1蛋白Elisa
戊糖片球 Boc-1-氨基环烷甲血清运铁蛋白受体Elisa
布鲁氏 生物Ⅵ型 戊酸钠原钙黏1Elisa
变紫青霉 2--3-甲基-4-(甲基磺酰)雌酮Elisa
尖孢镰刀胡麻专化型 5-氨基-2-三氟颗粒蛋白前体Elisa
梨形毛霉 O,O-二乙基二硫代磷酸, 一般为谷受体2AElisa
屎肠球 庚酸乙酯生长分化因子7Elisa
中慢生华癸根瘤 4,4'-亚甲基-双(3--2,6-二乙基苯)骨成型蛋白8AElisa
枯草芽孢杆 1-(2-苄氧基-4-氟苯基)乙酮生长分化因子6Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。