详细介绍
产品分类:细胞培养
储存条件 4℃,12个月
用途 Hanks' Balanced Salt Solution为含钙镁的Hanks平衡盐溶液,常用于悬浮、清洗细胞。
注意事项 主要由氯化钙、硫酸镁、氯化镁、氯hau钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、氯化钠、酚红等组成。该粉剂溶解于水,如需无菌溶液,应过滤除菌,不可高压灭菌,并密闭保存。
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
Hanks平衡盐粉剂 | 1L | FS-R6354 |
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克?。洌┑男纬汕榭觥<涞男纬煽赡芑剐枰恢芑蛘吒嗟氖奔?,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
酪羟化(TH)TH ELISA Kit过氧化物?;趸?抗体包装25g
跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)TMEM97/MAC30 ELISA Kit胆固?;?抗体包装5g
克细胞蛋白(CC16)CC16 ELISA Kit磷化间变型淋巴瘤激抗体包装1g
可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)sTRAIL ELISA Kit磷化ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体包装5g
可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit磷化有丝分裂激B/C抗体包装1g
可溶性血栓调节蛋白(sTM)sTM ELISA Kit磷化腺泡Acinus蛋白抗体包装25g
可溶性血凝样氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)sLOX-1 ELISA Kit磷化肾上腺能受体β2抗体包装5g
可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)sEPCR ELISA KitAPS抗体包装25g
可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGF R1/sFlt1)sVEGF R1/sFlt1 ELISA Kit激活受体样激1抗体包装5g
可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)sICAM-1 ELISA Kit激活A受体1B抗体包装100ml
可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)sTREM-1 ELISA Kit磷化雄激受体抗体包装25ml
可溶性瘦受体(sLR)sLR ELISA Kit磷化A-Raf抗体包装5ml
可溶性凝集样氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)sLOX-1 ELISA Kit酰基鞘脱酰2抗体包装100ml
可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)sMHC-2 ELISA Kit脂肪特异性粘附分子抗体包装1g
可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)sMHC-1 ELISA Kit腺相关病5抗体包装5g
双调蛋白(结肠直肠源性生长因子)抗体C反应蛋白(CRP)Pictilisib (GDC-0941) is a potent inhibitor of PI3Kα/δ with IC50 of 3 nM in cell
Hanks平衡盐粉剂CLEC5A/MDL1/FITC 荧光标记C型凝集结构域家族5成员AIgG高效氟菊酯 ,99%
CLEC13D/MMR1/CD206/FITC 荧光标记巨噬甘露糖受体IgG高效氟菊酯标准溶液 0μg/ml,u=2%,体:石油
Clostridium perfringens type D/FITC 荧光标记兔抗D型产气荚膜梭菌IgG高效氟菊酯标准溶液 μg/ml,u=3%,体:石油
cofilin/FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠丝切蛋白IgG高效氟菊酯 ,96%
Phospho-Cofilin (Ser3) /FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠化丝切蛋白IgG氟菊酯标准溶液 0μg/ml,u=4%,体:正己烷
Cortactin/FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠皮层肌动蛋白IgG氟菊酯标准溶液 μg/ml,u=5%,体:正己烷
Cortactin (phospho Tyr466) /FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠化皮层肌动蛋白IgG菊酯 ,97.5%
COLEC12/CL-P1/FITC 荧光标记凝集胎盘蛋白1IgG菊酯 ,99.7%