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详细介绍
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321223 |
商品介绍：
测定意义蔗糖转化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据最适 pH，将高等植物Ivr分为酸性转化酶（AI）和中性转化酶（NI）两种类型。 NI主要存在于细胞质中，负责分解细胞质中蔗糖为果糖和葡萄糖。测定原理NI催化蔗糖分解产生还原糖，进一步与3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范围内510nm光吸收值与还原糖生成量成正比。通过光吸收增加速率来计算NI活性自备用品可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹ń┨寤╩l）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提?。喊凑昭澹ń┨寤╩l）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑兆橹柿浚╣）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提?。喊凑兆橹柿浚╣）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提?。合仁占赴蛳妇嚼胄墓苣冢锨?，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4?！鰽测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
丹皮原苷；牡丹原甙(标准品)英文名： Wilforlide A免疫球蛋白结合蛋白-1抗体包装25g
丹叶大黄英文名： Forsythoside E胰岛样生长因子不稳定亚基ALS抗体包装5g
丹叶大黄-3'-O-葡萄糖苷英文名： Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine猪胰岛单克抗体包装1g
丹芝B(标准品）英文名： EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea ExtractKB抑制蛋白激α/IκBα/IKK-α/IKKα/I-κB-α 抗体包装5g
单白前苷B英文名： Deoxycholic acid抗重组人胰岛抗体包装5g
胆固(标准品)英文名： Calcein-AM 磷化肌聚磷盐磷样蛋白1抗体包装25g
胆红(标准品)英文名： Nicotinamide胰岛受体抗体包装5g
胆木（标准品）英文名： cucurbitacins胰岛受体α抗体包装1g
胆(标准品)英文名： 5-Hydroxytryptophan（5-HTP）胰岛受体β抗体包装5g
淡豆豉（标准品）英文名： 5-HydroxytryptophanKB抑制蛋白激α/β抗体包装10mg
蛋黄磷脂酰英文名： Imazapyr acid白介12抗体包装250mg
当归（标准品）英文名： Imazapyr acid干扰诱导35蛋白抗体包装100ml
当归尾（标准品）英文名： Lithocholic Acid完整膜蛋白E25A抗体包装1g
当归?；昝仔?/span>H(标准品)英文名： Potassium Oxonate小肠型脂肪结合蛋白抗体包装5g
当归?；昝仔?/span>O英文名： Potassium Oxonate胰岛降解抗体包装1g
多刺链霉菌Streptomyces│echinatus 质量规格：≥90.0%,BR汉黄芩苷;Wogonoside
脱氮卓贝尔氏菌Zobellella│denitrificans 质量规格：>99%,BR,二合物颗粒体蛋白试剂盒黄芩;Baicalein
猴头菌Hericium│erinaceus 质量规格：HPLC≥98%,标准品颗粒溶试剂盒黄豆黄苷; Glycitin
中性转化酶（NI）测试盒50管/24样*松乳菇 1-(4-基)-3-甲基-5-吡唑啉酮环磷酸鸟苷Elisa
乌饭树拟茎点霉 2,5-二溴己二酸二乙酯NADH还原Elisa
豇豆慢生根瘤 4-溴邻苯二甲酸酐色C还原Elisa
阪崎肠杆 亚磷酸二甲酯布鲁东氏酪激Elisa
淡黄曲霉 5-吡啶-2-羧酸铜锌超氧化物歧化Elisa
黑曲霉 DL-2-甲基丁酸甲酯L-天冬氧化Elisa
裂孔平伏 2-特戊酰氨基-6-皮考啉交替氧化Elisa
菊苣假单胞 2-特戊酰基吡啶脱氢Elisa
酿酒酵母 1-萘基异酸酯V型ATPElisa
芽孢杆 5-氟-2-异亚基氨基氧苯脱氧核糖核酸Elisa
枯草芽孢杆 溴二酸二甲酯透明质酸Elisa
酿酒酵母 钠固氮Elisa
华根霉 3,5-二甲基-1-氢-吡咯-2-羧酸叔丁酯-4-羧酸乙酯条纹花叶病Elisa
黄?。啥┕海?/span> 2-溴二苯并线条花叶病Elisa
毕赤酵母 3,4-二肼盐酸盐1.6二磷酸果糖酸Elisa
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