详细介绍
产品分类:染色其他
储存条件:室温,12个月
用途:生物染色
注意事项:主要由结晶紫和去离子水组成。
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
结晶紫水溶液 | 100ml | FS-R7150 |
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克?。洌┑男纬汕榭?。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
拟青霉DISC1 C端抗体Human PLAC1 (Placenta-specific protein 1) ELISA KIT人Tau蛋白免疫试剂盒
球孢白僵菌DISC1 N端抗体Human PRLR(Prolactin receptor) ELISA Kit人TAR DNA结合蛋白43(TARDBP/TDP43)免疫试剂盒
布氏虫草多能发育相关基因2抗体Human PRLHR(Prolactin-releasing peptide receptor) ELISA Kit人s腺苷同型半胱(SAH)免疫试剂盒
Sphingopyxis contaminans 结肠直肠癌缺失基因抗体Human PGM5 (Phosphoglucomutase-like protein 5) ELISA KIT人Syndecan-3/(SDC3)免疫试剂盒
产克雷伯氏菌多巴脱羧抗体Human PGM3 (Phosphoacetylglucosamine mutase) ELISA KIT人Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫试剂盒
灰黄青霉防御β1/Defensin β1抗体Human PRPS2 (Ribose-phosphate pyrophosphokinase 2) ELISA KIT人SWI/SNF相关, 基质关联,肌动蛋白依赖染色质调控因子,亚家族c,成员1(SMARCC1)免疫试剂盒
猴头抗体Human PEAR1 (Plaet endothelial aggregation receptor 1) ELISA KIT人STEAP家族成员4(Steap4)免疫试剂盒
Bacillus myloliquefaciens subsp. plantarum DLX4抗体Human MYOM3(Myomesin-3) ELISA Kit人STEAP家族成员1(Steap1)免疫试剂盒
青霉属DTX1抗体Human PCLO (Protein piccolo) ELISA KIT人Stathmin 1(STMN1)免疫试剂盒
Pestalotiopsis neglecta丝裂原活化蛋白激磷-1抗体Human PIEZO1(Piezo-type mechanosensitive ion channel component 1) ELISA Kit人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)免疫试剂盒
红色红曲霉丝裂原活化蛋白激磷-2抗体Human SMG1 (Serine/threonine-protein kinase SMG1) ELISA KIT人Spondin-2 免疫试剂盒
短杆状马赛菌质分裂付出蛋白1抗体Human PIGW (Phosphatidylinositol-glycan biosynthesis class W protein) ELISA KIT人SPARC相关??榛平岷系鞍?(SMOC2)免疫试剂盒
土星孢青霉脑表皮生长因子跨膜蛋白DNER抗体Human PID1 (PTB-containing, cubilin and LRP1-interacting protein) ELISA KIT人SPARC相关??榛平岷系鞍?(SMOC1)免疫试剂盒
柱形矛束霉DUX3蛋白抗体Human CACNA1A(Voltage-dependent P/Q-type calcium channel subunit alpha-1A) ELISA Kit人SMAD3 免疫试剂盒
费雷生枝霉死亡相关蛋白1抗体Human PITPNC1 (Cytoplasmic phosphatidylinositol transfer protein 1) ELISA KIT人SMAD2 免疫试剂盒
平脐儒孢菌轴丝动力蛋白重链9抗体Human PIGW (Phosphatidylinositol-glycan biosynthesis class W protein) ELISA KIT人SHC转化蛋白1(SHC1)免疫试剂盒
致病性大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:100µg/mL,基体:1%HNO3黑介子苷
毛柄金钱菌(金针菇)Flammulina│velutipes 质量规格:1000µg/mL,基体:10%HCL维生B5
根瘤菌Rhizobium│yanglingense Tan et al. 质量规格:1000μg/ml枸杞多糖
结晶紫水溶液Human Thymosin Alpha1 ELISA Kit 人α1规格: 48T
CCP(Human complement control protein) ELISA Kit 人补体调节蛋白规格: 48T
PBP/CXCL7(Human platelet basic protein) ELISA Kit 人血小板性蛋白规格: 48T
HLA-C(Human leukocyte antigen C) ELISA Kit 人类白细胞抗原C规格: 48T
HLA-E(Human leukocyte antigen E) ELISA Kit 人类白细胞抗原E规格: 48T