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mirus Trans IT-VirusGEN® 转染试剂
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访问次数:292更新时间:2024-03-18 12:39:41

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供货周期 一个月 应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药
mirus Trans IT-VirusGEN® 转染试剂
旨在增强包装和转移质粒向贴壁和悬浮 HEK 293 细胞类型的递送,以增加重组腺相关病毒 (AAV) 和慢病毒的产量。
产品介绍

mirus Trans IT-VirusGEN® 转染试剂

Trans IT-VirusGEN® 转染试剂 旨在增强包装和转移质粒向贴壁和悬浮 HEK 293 细胞类型的递送,以增加重组腺相关病毒 (AAV) 和慢病毒的产量。

Trans IT-VirusGEN® 转染试剂的主要优点 包括:

  • 性能 – 高效 DNA 递送,用于生产高滴度病毒载体

  • 可扩展性 – 从 < 1 ml 到大规模培养的高效生产

  • 灵活性 ——兼容不同的重组病毒和细胞培养系统

  • 无动物源性 – 全合成转染试剂配方

Trans IT-VirusGEN® 是学术研究和生物制药发现的理想选择。使用 VirusGEN® AAV 转染试剂盒和 VirusGEN® LV 转染试剂盒中包含的优化增强剂可以进一步提高滴度。

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Trans IT-VirusGEN® 在悬浮和贴壁 AAV 细胞培养中优于竞争对手试剂。 在 FreeStyle™ F17 培养基 (A) 中生长的悬浮 FreeStyle™ 293-F 细胞或贴壁 293T/17 细胞 (B) 用 pAAV-hrGFP、pAAV-RC 和 pAAV-Helper(比例为 1:1:1,1.5 µg)转染/ml,Agilent Technologies),使用以下试剂:  Trans IT-VirusGEN®(2:1,体积:重量)、竞争产品 B4 (3:1)、竞争产品 B5 (3:3:1) 或 25 kDa PEI (4: 1、综合科学)。使用收获的病毒转导 HT1080 细胞,并在转导后 48 小时使用番石榴 easyCyte™ 5HT 流式细胞仪测量 GFP 表达。功能效价是通过 GFP 阳性细胞少于 20% 的病毒稀释液来测量的。误差线代表一式三份孔的标准偏差。

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Trans IT-VirusGEN® 在悬浮和贴壁慢病毒细胞培养中优于竞争对手试剂。 在 FreeStyle™ F17 培养基 (A) 中生长的悬浮 FreeStyle™ 293-F 细胞或贴壁 293T/17 细胞 (B) 用 pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™ 转移载体和由 MISSION® 提供支持的慢病毒包装混合物转染( 1:1 比例,1 µg/ml),使用以下试剂:  Trans IT-VirusGEN®(3:1,体积:重量)、竞争产品 B4(2:1 (A) 或 3:1 (B))、竞争产品 B5 (2:2:1 (A) 或 3:3:1 (B))或 25 kDa PEI(4:1,Polysciences)。收获上清液,过滤(0.45 µm),并使用 293T/17 细胞进行滴定。慢病毒转导在 8 µg/ml Transduce存在下进行 转导后 72 小时使用番石榴 easyCyte™ 5HT 流式细胞仪测量 IT™ 和 GFP 表达。功能效价是通过 GFP 阳性细胞少于 20% 的病毒稀释液来测量的。误差线代表一式三份孔的标准偏差。

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Trans IT-VirusGEN® 实现广泛的可扩展性 (AAV)。 使用 pAAV-hrGFP、pAAV-RC 和 pAAV-Helper(比例为 1:1:1,总计 1.5)转染在 FreeStyle™ F17 培养基 (A) 中生长的悬浮 FreeStyle™ 293-F 细胞或贴壁 293T/17 细胞 (B) µg/ml,Agilent Technologies),使用 Trans IT-VirusGEN® 转染试剂(试剂与 DNA 比例为 2:1(体积:重量),Mirus)在一定体积的培养皿中。收获的病毒用于转导 HT1080 细胞,并在转导后 48 小时通过流式细胞术测量 GFP 表达。功能效价是通过 GFP 阳性细胞少于 20% 的病毒稀释液来测量的。误差线代表一式三份的孔、烧瓶或培养皿的标准偏差。

 

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与 PEI 相比, Trans IT-VirusGEN®具有更高的慢病毒生成转染效率 。 使用Trans IT-VirusGEN® 转染试剂(试剂与 DNA 比例为 3:1;体积:重量),用慢病毒包装质粒和 (a) 对照 RFP 转移质粒或 (b) 靶向 SPdCas9-RFP 转移质粒转染 HEK293T/  17 细胞) 或 25 kDa 线性 PEI(试剂与 DNA 比例为 3:1;重量:重量)。转染后 17-22 小时拍摄明场和 RFP 图像。


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