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A液（80ml）：1％氯化金，lml；雙重蒸餾水，79ml。
B液（20m1）：1％檸檬酸鈉，4ml；1％單寧酸，0.lml；雙重蒸餾水，15．8ml。25mmol/L K2C03，0．1ml；
將上述A液加熱到60℃，然后將B液快速加入到A液中，繼續(xù)攪拌，在極短的時間內(nèi)加熱到煮沸（大約10min），此時顏色由黑一藍一亮紅（近似紅葡萄酒顏色）變化。pH調(diào)到所需要求（根據(jù)所標記蛋白質(zhì)種類的不同，所需的pH也不一樣）。上述用量合成的膠體金為10nm，根據(jù)所加入鞣酸（或稱單寧酸）量的不同，可合成3—17nm顆粒大小的膠體金，見表。
鞣酸－檸檬酸鈉還原法制備方案
┌─────────┬──────────────────────────────┬───────────┐
│ │ B液 │ A液 │
│ 顆粒直徑/llm │ │ │
│ ├──────────────────────────────┼───────────┤
│ │1％檸檬酸鈉/ml 0．1mol/L K2C03/ml l％鞣酸/ml H20/ml │l％氯化金/ml HzO/ml │
├─────────┼──────────────────────────────┼───────────┤
│ 5 │ 4 0．2 0．7 15．1 │ 1 79 │
│ 10 │ 4 0．025 O．1 15．875 │ l 79 │
│ 15 │ 4 O．0025 0．02 15．9875 │ 1 79 │
└─────────┴──────────────────────────────┴───────────┘
A、B兩液混合后顏色改變的時間，在制備過程中基本以此表變化來決定加溫見表
A、B兩液混合后顏色改變所需的時間
┌───────┬────────┬───────┬───────┬────────┬────────┐
│ 顆粒直徑/nm │ 變藍時間/s │變紅時間/min │ 顆粒直徑/nm │ 變藍時間/s │ 變紅時間/min │
├───────┼────────┼───────┼───────┼────────┼────────┤
│ 5 │ 2 │ 3 │ 15 │ 300 │ 45 │
│ 10 │ 10 │ 10 │ │ │ │
└───────┴────────┴───────┴───────┴────────┴────────┘
在鞣酸—檸檬酸鈉還原法中，檸檬酸鈉是主要的還原劑；而鞣酸則具有雙重作用，既起還原作用，也有保護作用，它控制著“晶核”的形成過程，故可改變鞣酸的用量來制備不同顆粒的膠體金。
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