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上海研谨生物科技有限公司

B95-8绒猴EBV转化的白细胞

时间:2015-3-25阅读:1613
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细胞名称          B95-8绒猴EBV转化的白细胞 

种属            绒猴 

组织来源          外周血 

生长状态          悬浮细胞 

培养条件          培养基类型:RPMI1640培养基 

              FBS:10% 

              抗生素:双抗 

              培养条件:37℃,CO2:5% 


传代方法          收到细胞后,在倒置显微镜下观察细胞生长状态: 

                  如果没长满,将培养瓶用75%酒精消毒后在超净台内更换新鲜 

              培养液,继续培养。 

                  如果细胞已经长满(约80%-90%)则传代后继续培养。 

              贴壁细胞传代方法: 

              1弃去培养基,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。 

              2加1ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),让胰酶与大部分细胞接触 

              后放入37℃培养箱内,随时观察细胞状态变化,待细胞大部分变 

              圆后加*培养基终止消化。 

              悬浮细胞传代方法:可以直接传代也可以离心法传代。 

              1直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后,将上清吸掉1/2-2/3, 

              吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续 

              培养。 

              2离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内,1000rpm, 

              5分钟,去除上清,加新的培养液到离心管内,吹打细胞形成细胞 

              悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。 

               一般没有特殊说明,细胞一般是一传二。 

冻存方法          70%*培养基,20%FBS,10%DMSO,现用现配。 

              储存:液氮中长期保存。 

注             1观察细胞在低倍镜下观察,便于整体估计细胞密度。 

              2在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落,可 

              离心吹打后重新种入瓶中培养。 

              3收到细胞后若发现培养瓶破损、细胞污染等,请在一周内与我们 

              。

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