Fluorogenic Substrates

haemtech含氟底物

基于ANSN的成花底物的一般結(jié)構(gòu)
闡述了6-氨基-1-萘磺酰胺（ANSN）熒光底物的一般結(jié)構(gòu)。在目前的化合物家族中，R1是一種三肽，其COOH末端殘基通常是精氨酸。R2和R3可以是氫、烷基、芳基或環(huán)烷基。虛線表示各種絲氨酸蛋白酶水解的位置。

含有熒光報(bào)告基團(tuán)6-氨基-1-萘磺酰胺（ANSN）的底物是監(jiān)測各種絲氨酸蛋白酶（1-12）酶活性的有用化合物。在這類化合物中，ANSN報(bào)告基團(tuán)（在R1位置）與短的三肽序列相連。肽序列的設(shè)計(jì)是為了優(yōu)化酶和底物之間的相互作用?？梢蕴砑拥絉2和R3位置的附加組分反映了P'亞基位置的變化，并且通常會(huì)影響底物的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。作為有效底物的化合物在三肽和ANSN基團(tuán)之間水解。一旦從肽段分離，ANSN基團(tuán)的相對(duì)熒光強(qiáng)度增加了約1000倍。
下頁確定的動(dòng)力學(xué)特性將有助于選擇合適的底物。ANSN底物被證明特別適用于因子VIIa（1-5,7,9,10,12）的分析。盡管僅因子VIIa的底物水解速率相對(duì)較慢，但當(dāng)將組織因子納入分析系統(tǒng)時(shí)，化合物SN-17a等幾種化合物的kcat發(fā)生了很大變化。
使用信息：
在二甲基亞砜中，以10mM的儲(chǔ)備溶液形式提供基于ANSN的底物，通常用于分析濃度范圍為400 nM至50pM的酶。ANSN底物通常在50至100µM的終濃度下使用，并且可以在大多數(shù)生理緩沖液（即TBS、HBS、PBS等）中稀釋到該終濃度。反應(yīng)（熒光的相對(duì)變化）可使用標(biāo)準(zhǔn)熒光計(jì)或熒光板閱讀器進(jìn)行監(jiān)測。儀器設(shè)置在以下波長（激發(fā)=352nm，發(fā)射=470nm）時(shí)，可以使用動(dòng)力學(xué)或端點(diǎn)模式。通過在發(fā)射光束中使用390到450nm長通截止濾波器，可以將光偽影小化。

下表列出了每種基質(zhì)的動(dòng)力學(xué)特性，下表列出了使用實(shí)例的期刊參考文獻(xiàn)列表。
二甲基亞砜中的儲(chǔ)備基質(zhì)溶液應(yīng)在4°C或更低溫度下冷凍保存，并應(yīng)避光。在這些條件下，化合物將保持穩(wěn)定一年以上。
**下表關(guān)鍵字：Km=µM；kcat=s-1；kcat/Km=M-1s-1 x 10-5；ND=未確定

•  SN-5 6-ami-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substratePricing: Please Inquire

  Structure	D-AFK-ANSNH-iC4H9.2HBr
  Useful For	Useful for plasmin

  Formulation	DMSO
  Concentration	10 mM

  Kinetic Properties	IIa	VIIa	VIIa/TF	Xa	XIa	aPC	tPA	Plasmin
  KM	ND	ND	ND	ND	ND	ND	ND	130
  Kcat	ND	ND	ND	ND	ND	ND	ND	3.7
  Kcat/KM	ND	ND	ND	ND	ND	ND	ND	0.28

•  SN-7 6-ami-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substratePricing: Please Inquire

   

  Structure	Mes-D-LGR-ANSN(C2H5)2
  Useful For	Useful for factor Xa

  Formulation	DMSO
  Concentration	10 mM

  Kinetic Properties	IIa	VIIa	VIIa/TF	Xa	XIa	aPC	tPA	Plasmin
  KM	31	180	200	125	580	113	ND	ND
  Kcat	0.63	0.007	0.79	36	15	0.055	ND	ND
  Kcat/KM	0.2	ND	0.04	2.9	0.26	0.005	ND	ND

•  SN-13a 6-ami-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substratePricing: Please Inquire

   

  Structure	D-LPR-ANSNH-C3H7 • 2 HCl
  Useful For	Useful for factor XIa

  Formulation	DMSO
  Concentration	10 mM

  Kinetic Properties	IIa	VIIa	VIIa/TF	Xa	XIa	aPC	tPA	Plasmin
  KM	0.5	300	300	171	75	45	98	ND
  Kcat	19	0.07	4.5	3.3	53	52	0.31	ND
  Kcat/KM	380	0.002	0.15	0.19	7.1	12	0.03	ND

•  SN-17a 6-ami-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substratePricing: Please Inquire

   

  Structure	D-FPR-ANSNH-C6H11 • 2 HCl
  Useful For	Useful for Thrombin & VIIa

  Formulation	DMSO
  Concentration	10 mM

  Kinetic Properties	IIa	VIIa	VIIa/TF	Xa	XIa	aPC	tPA	Plasmin
  KM	0.4	150	330	150	ND	7.8	36	ND
  Kcat	17	0.05	8.4	0.32	ND	6.6	0.074	ND
  Kcat/KM	430	0.004	0.25	0.02	ND	8.6	0.02	ND

•  SN-17c 6-ami-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substratePricing: Please Inquire

   

  Structure	D-FPR-ANSNH-C4H9 • 2 HCl
  Useful For	Useful for factor VIIa

  Formulation	DMSO
  Concentration	10 mM

  Kinetic Properties	IIa	VIIa	VIIa/TF	Xa	XIa	aPC	tPA	Plasmin
  KM	ND	186	102	ND	ND	53	ND	ND
  Kcat	ND	0.11	2.7	ND	ND	21	ND	ND
  Kcat/KM	ND	0.006	0.26	ND	ND	4	ND	ND

•  SN-18 6-ami-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substratePricing: Please Inquire

   SAFETY DATA SHEET

  Structure	Boc-L-(p-F)FPR-ANSNH-C2H5
  Useful For	Useful for tPA

  Formulation	DMSO
  Concentration	10 mM

  Kinetic Properties	IIa	VIIa	VIIa/TF	Xa	XIa	aPC	tPA	Plasmin
  KM	3.7	50	217	ND	ND	ND	71	ND
  Kcat	44	0.008	0.88	ND	ND	ND	1.03	ND
  Kcat/KM	120	0.002	0.04	ND	ND	ND	0.15	ND

•  SN-20 6-ami-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substratePricing: Please Inquire

   SAFETY DATA SHEET

  Structure	Boc-L-FPR-ANSNH-C2H5
  Useful For	Useful for thrombin

  Formulation	DMSO
  Concentration	10 mM

  Kinetic Properties	IIa	VIIa	VIIa/TF	Xa	XIa	aPC	tPA	Plasmin
  KM	17	ND	ND	100	ND	540	47	ND
  Kcat	58	ND	ND	0.31	ND	2.2	0.011	ND
  Kcat/KM	34	ND	ND	0.003	ND	0.04	0.002	ND

•  SN-45 6-ami-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substratePricing: Please Inquire

   SAFETY DATA SHEET

  Structure	L-EGR-ANSNH-C3H7 • 2 HBr
  Useful For	Useful for factor XIa

  Formulation	DMSO
  Concentration	10 mM

  Kinetic Properties	IIa	VIIa	VIIa/TF	Xa	XIa	aPC	tPA	Plasmin
  KM	100	ND	ND	110	225	440	ND	ND
  Kcat	2.5	ND	ND	0.2	82	17	ND	ND
  Kcat/KM	0.25	ND	ND	0.02	3.6	0.39	ND	ND

•  SN-54 6-ami-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substratePricing: Please Inquire

   

  Structure	BOC-D-VLR-ANSNH-C4H9
  Useful For	Useful for aPC

  Formulation	DMSO
  Concentration	10 mM

  Kinetic Properties	IIa	VIIa	VIIa/TF	Xa	XIa	aPC	tPA	Plasmin
  KM	19	42	170	19	ND	3.9	ND	ND
  Kcat	0.055	0.007	1.6	0.055	ND	2.1	ND	ND
  Kcat/KM	0.03	0.002	0.09	0.03	ND	5.2	ND	ND