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上海起發(fā)實驗試劑有限公司

swant 鈣結(jié)合蛋白D28K兔單克隆抗體說明書

時間:2019-11-15閱讀:1828
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swant 鈣結(jié)合蛋白D28K兔單克隆抗體說明書

產(chǎn)品名稱鈣結(jié)合蛋白D28K兔單克隆抗體

 

英文名稱Rabbit anti-Calbindin D-28k

 

貨號swant CB38

 

批號9.03

 

外觀凍干粉.

 

      溶解200 µl雙蒸水

 

規(guī)格200ul

 

產(chǎn)品描述

該抗體是針對重組大鼠鈣結(jié)合蛋白D-28kCB)制備的。它與許多其他物種的鈣結(jié)合蛋白D-28k發(fā)生交叉反應(yīng),包括人、猴子、大鼠、小鼠、雞和魚(圖1)。免疫印跡結(jié)果顯示CB38識別位點(diǎn)約為27-28 kDa的單一條帶。當(dāng)抗體濃度提高(比CB10倍)樣本中存在的其它鈣結(jié)合相關(guān)蛋白如:鈣網(wǎng)膜蛋白也會被檢出,Western blots結(jié)果可見分子量較大的條帶(29-30kda)。因此,抗體的稀釋度和/免疫染色的敏感性可影響抗體的檢測專一性,其它相關(guān)鈣結(jié)合蛋白也會被檢測到。如果希望抗體專一性更好,建議用calbindin D-28k的單克隆抗體300,專一識別鈣結(jié)合蛋白28k。

 

反應(yīng)種屬:

人、猴、兔、大鼠、小鼠,豚鼠、斑馬魚,雞。

 

經(jīng)測試應(yīng)用:

WB, IHC-P

WB 免疫印跡; IHC :免疫組織化學(xué)。

 

稀釋比例

免疫組化(IHC): 1:10'000 - 1:20'000 生物素標(biāo)記

免疫印跡(WB): 1:100 - 1:1'000

   建稀釋比例根據(jù)預(yù)實驗摸索。

 

儲存

解凍后分裝(如每管2-5 ul等)保存于- 80°C冰箱。短期保存-20°C。近期頻繁使用保存于 4°C (增加0.01% 疊氮鈉)。避免反復(fù)凍融。

 

 

 

 

WB檢測結(jié)果:

 

1 2 3 4 5 6 7

  28 KDa

1 不同種屬腦組織勻漿液CB38檢測結(jié)果。上樣順序依次為:1 小鼠;2 大鼠;3 豚鼠;4 兔子;5 食蟹猴;6 斑馬魚;7 雞。所有種屬僅檢測到分子量為28 KDa 的條帶。.

鈣結(jié)合蛋白 D-28k 基因敲除小鼠免疫組化:

鈣結(jié)合蛋白D-28K高表達(dá)于正常小鼠腦組織神經(jīng)元圖2a)calretinin基因敲除小鼠腦組織區(qū)域未見陽性表達(dá)(圖2b)。

                                                                                        

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 2a: CB 38正常小鼠腦組織免疫組化染色結(jié)果: 結(jié)果顯示小腦浦肯野細(xì)胞(P )分子層 樹突(M)及軸突(A)均顯示強(qiáng)陽性,100x鏡下。

 2b:  CB 38基因敲除小鼠免疫組化染色結(jié)果:對應(yīng)浦肯野細(xì)胞(P )分子層樹突(M)及軸突(A)未見鈣結(jié)合蛋白 D- 28k特異性染色 (1)  100x鏡下。

                                                                                       

 

參考文獻(xiàn)

1. Airaksinen M.S., et al, (1997), PNAS 94(4) : 1488-14

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