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genebridges K006說明書
Quick & Easy E. coli Gene Deletion Kit
gene bridges快速簡便的大腸桿菌基因刪除試劑盒
細節(jié):
Red / ET的忠實重組
快速
可能有多個淘汰賽
方便地去除重組質(zhì)粒
該試劑盒旨在在不到一周的時間內(nèi)敲除或改變大腸桿菌染色體上的基因。
紅色/ ET重組使堿基對可以,特異性和忠實的方式交換遺傳信息。試劑盒隨附有FRT側(cè)翼的卡那霉素抗性標(biāo)記盒,可用于替換大腸桿菌染色體上的基因。Red / ET重組可替代大腸桿菌染色體上長達30kb的片段。如果需要,使用FRT側(cè)翼抗性盒替代目標(biāo)基因可以隨后通過FLP重組酶步驟去除選擇標(biāo)記。FLP表達質(zhì)??梢詮腉ene Bridges購買。重復(fù)插入試劑盒隨附的功能盒或與Gene Bridges提供的其他功能盒組合可產(chǎn)生多個基因敲除。重組過程由于pRed / ET表達質(zhì)粒的優(yōu)化設(shè)計而受到嚴(yán)格控制。重組蛋白的基因在誘導(dǎo)型啟動子的控制下,質(zhì)粒帶有溫度敏感的復(fù)制起點,可在重組后方便地除去質(zhì)粒。
兩個Red / ET重組蛋白表達質(zhì)粒pRed / ET(tet)和pRed / ET(amp)。通過用這些質(zhì)粒轉(zhuǎn)化,可將任何大腸桿菌菌株制成Red / ET精通的
FRT位于卡那霉素抗性模板的側(cè)面(FRT-PGK-gb2-neo-FRT),可用于您自己的實驗。
陽性對照,用于替換大腸桿菌染色體上的甘露糖轉(zhuǎn)運蛋白(man X)基因。
詳細的協(xié)議,質(zhì)粒,圖譜和序列的描述
FRT-PGK-GB2-NEO-FRT
FRT 啟動子neo R 終止子
AATTAACCCTCACTAAAGGGCGGCCGC GAAGTTCCTATTCTCTAGAAAGTATAGG AACTTC ATTCTACCGGGTAGGGGAGGCGCTTTTCCCAAGGCAGTCTGGAGCATGC GCTTTAGCAGCCCCGCTGGGCACTTGGCGCTACACAAGTGGCCTCTGGCCTCGCA CACATTCCACATCCACCGGTAGGCGCCAACCGGCTCCGTTCTTTGGTGGCCCCTT CGCGCCACCTTCCACTCCTCCCCTAGTCAGGAAGTTCCCCCCCGCCCCGCAGCTC GCGTCGTGCAGGACGTGACAAATGGAAGTAGCACGTCTCACTAGTCTCGTGCAGA TGGACAGCACCGCTGAGCAATGGAAGCGGGTAGGCCTTTGGGGCAGCGGCCAATA GCAGCTTTGCTCCTTCGCTTTCTGGGCTCAGAGGCTGGGAAGGGGTGGGTCCGGG GGCGGGCTCAGGGGCGGGCTCAGGGGCGGGGCGGGCGCCCGAAGGTCCTCCGGAG GCCCGGCATTCTGCACGCTTCAAAAGCGCACGTCTGCCGCGCTGTTCTCCTCTTC CTCATCTCCGGGCCTTTCGACCTGCAGCAGCACGTGTTGACAATTAATCATCGGC ATAGTATATCGGCATAGTATAATACGACAAGGTGAGGAACTAAACCATGGGATCG GCCATTGAACAAGATGGATTGCACGCAGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGC TATTCGGCTATGACTGGGCACAACAGACGATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTT CCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGGTTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGT GCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGCAGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGG GCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGACGTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCT GCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGGATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCC GAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGCAATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGG CTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCGAAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCG GATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGGATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTC GCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCTCAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATC TCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGCTTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCG CTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCCGGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGAC ATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGCTGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACC GCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCCGCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTA TCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGAGCGGGACTCTGGGGTTCGAATAAAGACCGA CCAAGCGACGTCTGAGAGCTCCCTGGCGAATTCGGTACCAATAAAAGAGCTTTAT TTTCATGATCTGTGTGTTTGTTTTTGTGTGCGGCGCG GAAGTTCCTATTCTCTAG AAAGTATAGGAACTTCCTCGAGCCCTATAGTGAGTCGTATTA
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