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 大肠杆菌O157:H7的测试片检测方法

方法编号：5043

1 适用范围：用于各类食品以及人体体检样品中大肠杆菌O157:H7的检测。以及突发事件应急检测需要。

2 方法原理：采用选择性显色培养基作为主要原料，加入专一性酶显色剂，运用微生物测试片技术，做成一次性快速检验产品，通过接种、培养，如果样品中含有大肠杆菌O157:H7，即可在纸片上呈现紫红色的菌落。

3 操作方法

3．1 样品处理：无菌操作取25g（mL）样品放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，充分振摇或置均质器中制成样品匀液，静置片刻。

3．2接种：将测试片水平放在台面上，小心揭开上盖膜，用灭菌吸管吸取1 mL样品上清液或增菌液，均匀加到中央的滤纸片上，然后轻轻将上盖膜放下，静置5min。每个样品接种两片。

3．3培养：将加了样的测试片叠放在一起，放入原来的自封袋中，堆叠片数不超过12片，透明膜向上平放在37℃培养箱内培养15h～24h。

3．4结果观察：对测试片进行观察，呈紫红色的菌落为大肠杆菌O157:H7；呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。

4附加说明

4．1 本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测，用取样棉签涂抹被测物体表面，放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中，摇晃10s，然后取1mL接种到测试片上。

4．2注意使用过的纸片上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。

4．3出现阳性菌落的样本，用其他更为可靠的方法进行验证，没有条件的话至少再取样重复检验一次。