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臨床ELISA測(cè)定中可能會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題
閱讀：833 發(fā)布時(shí)間：2014-9-30| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 5.5KB |
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盡管ELISA測(cè)定的操作步驟非常簡(jiǎn)單，但有可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的因素卻較多，分布在測(cè)定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測(cè)定中出現(xiàn)問(wèn)題的可能原因，特對(duì)常見(jiàn)問(wèn)題及原因歸納總結(jié)于下表。
臨床ELISA測(cè)定中可能會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題及可能的原因問(wèn)題
可能的原因（非試劑盒本身的原因）
1．弱陽(yáng)性質(zhì)控樣本檢測(cè)不出 溫育的時(shí)間或溫度不夠；顯色反應(yīng)時(shí)間太短；所用配制緩沖液的蒸餾水有問(wèn)題
2．測(cè)定的重復(fù)性差 （相同樣本兩次測(cè)定結(jié)果不一致） 這是典型的由測(cè)定操作引起的問(wèn)題，包括
（1）加樣本及試劑量不準(zhǔn)；孔間不一致；
（2）加樣過(guò)快，孔間發(fā)生污染；
（3）加錯(cuò)樣本；
（4）加樣本及試劑時(shí)，加在孔壁上部非包被區(qū)；
（5）不同批號(hào)試劑盒中組分混用；
（6）溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致；
（7）孔內(nèi)污染雜物；
（8）酶標(biāo)儀濾光片不正確；
（9）血清標(biāo)本未*凝固即加入，反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞，易出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)等。
3．白板
（陽(yáng)性對(duì)照不顯色）
（1）漏加酶結(jié)合物；
（2）洗板液配制中出現(xiàn)問(wèn)題，如量筒不干凈，含酶抑制物（如疊氮鈉）等。
（3）漏加顯色劑A或B；
（4）終止劑當(dāng)顯色劑使用。
4．全部板孔均有顯色
（1）洗板不干凈；
（2）顯色液變質(zhì)；
（3）加底物的吸光受酶污染；
（4）洗板液受酶等污染。
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