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人谷氨酸脱羧酶试剂盒实验原理

阅读:1330          发布时间:2013-4-19

人谷氨酸脱羧酶试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人谷氨酸脱羧酶(GAD)水平。用纯化的人谷氨酸脱羧酶(GAD)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入谷氨酸脱羧酶(GAD),再与HRP标记的谷氨酸脱羧酶(GAD)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷氨酸脱羧酶(GAD)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人谷氨酸脱羧酶(GAD)浓度。

人谷氨酸脱羧酶试剂盒注意事项:
1
 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2
 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3
 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4
 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5
 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6
 底物请避光保存。
7
 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8
 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9
 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 
如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

 

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