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ELISA試劑盒實(shí)用小竅門,值得看看!

閱讀:1143          發(fā)布時(shí)間:2017-10-12

    我公司憑借多年來的銷售經(jīng)驗(yàn)和豐富的產(chǎn)品知識得到了廣大客戶的信賴與支持。今天起,我公司將不定期更新*ELISA劑盒實(shí)用小竅門,值得看看!
 

1. 標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素
① 嚴(yán)重溶血:以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性;
② 混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈
③ 如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng);
④ 標(biāo)本凝固不全,有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測,常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;
⑤ 采血試管洗滌不*、反復(fù)使用易交叉污染
⑥ 塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測,嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的 試劑 本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會(huì)使 抗體 效價(jià)跌落,所以測 抗體 的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。

 

2. 之操作技術(shù)的影響
① 應(yīng)保證清潔,整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
② 合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。
③ 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
④ 用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
⑤ 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。

 

    希望以上的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)實(shí)用小竅門能夠給您帶來實(shí)質(zhì)上的幫助,更多相關(guān)試劑盒的資料詳情歡迎您。 

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