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技術(shù)文章

掌握三點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不再是難題

閱讀:1408          發(fā)布時間:2016-1-5

ELISA 實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制選擇什么方程去擬合?做校準(zhǔn)曲線時,曲線擬合類型是選擇線性還是二次方程(曲線)。二者哪一個更?這兩個問題幾乎是剛開始接觸所有做ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的新手必問的問題。因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。恒遠(yuǎn)技術(shù)為您總結(jié)以下要點(diǎn):

1.在S曲線的低濃度部分可以用乘冪方程很好的擬合,中低濃度部門可以用直線方程,中間部門可用對數(shù)方程,而中后段可用四參數(shù)。免疫檢測時尺度點(diǎn)(可以是倍比稀釋的,也可以不是)濃度假如和相應(yīng)的吸光度(OD)值假如能夠呈現(xiàn)直線關(guān)系當(dāng)然是的了,從而推算出樣品的濃度值。

2、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程一般都是:Y=KX+B,K為正值。

3.做標(biāo)準(zhǔn)曲線,在不確定樣品中含量時,建議做個預(yù)分析,配個確定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,定下樣品中的含量,然后在這個含量的80%-120%或者更大的范圍做線性,一般要求相關(guān)系數(shù)大于0.99以上就說明線性可用。

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