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培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么？
閱讀：8973 發(fā)布時間：2019-10-24丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM，-20℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為1mM.
丙酮酸鈉是zui常見的丙酮酸鹽，是一類內(nèi)源性小分子物質(zhì)，丙酮酸鈉和丙酮酸均是天然存在于人體內(nèi)，并參與全身各組織和器官的代謝。丙酮酸鈉在醫(yī)學上、診斷試劑以及醫(yī)療器械中被廣泛用作緩沖劑、賦形劑和抗氧化劑。此外丙酮酸鈉在細胞培養(yǎng)中也是常用到的試劑之一，那么丙酮酸鈉在細胞培養(yǎng)中的作用是什么呢？
酮酸鈉在細胞培養(yǎng)中的作用：丙酮酸鈉在人體日常生活中，是惹你進行代謝生命活動所必須的，它是一種能量物質(zhì)，在科學研究進行的細胞培養(yǎng)試驗中，科學研究工作人員還發(fā)現(xiàn)了有作用類似的物質(zhì)，類似參與身體代謝活動的為人體提供行動的能量的物質(zhì)還有葡萄糖，乳酸鈉等，在人體中大多數(shù)細胞只利用葡萄糖就夠了，在細胞培養(yǎng)中丙酮酸鈉是必須的物質(zhì)。丙酮酸鈉在培養(yǎng)基中起到替代碳源的作用，參與細胞營養(yǎng)代謝。
丙酮酸鈉制備：
將領(lǐng)取的丙酮酸在車間內(nèi)放置一小時以上，將抽料管用干凈的聚酯纖維布包住管口，緩緩插入桶底部，用真空將丙酮酸 280kg抽入丙酮酸鈉反應(yīng)罐內(nèi)，抽畢，開攪拌，開攪拌，將預處理好的38~42℃碳酸鈉溶液緩緩壓至反應(yīng)罐內(nèi)（控制壓力在0.03~0.06MPa），控制反應(yīng)罐內(nèi)溫度不超過35℃（若反應(yīng)過程中，溫度超過35℃，應(yīng)采取降溫措施），反應(yīng)過程中應(yīng)進行pH值檢測，當反應(yīng)液pH值達到4.8~5.3（用精密試紙測定）時停止加料，控制加料時間約1小時，反應(yīng)完畢，將1440kg 95％乙醇緩緩抽入（管口應(yīng)用干凈的聚酯纖維布包住）反應(yīng)罐內(nèi)（加入時速度應(yīng)先慢后快，開始50%的量加入時間應(yīng)控制在60分鐘內(nèi)，后50%的量加入時間控制在30分鐘內(nèi)），抽畢，離心甩干，放入不銹鋼桶內(nèi)送入烘房，倒入雙錐真空干燥箱內(nèi)，控制真空度≥－0.09Mpa，熱水溫度為75~80℃，真空干燥器內(nèi)溫上升為65℃時，記錄起烘時間，控制真空干燥器內(nèi)溫度為65~70℃，保溫2小時，自起烘2小時后，請驗，干失≤0.5%，冷卻約20分鐘，出料，用20目過篩，包裝，入庫。收率應(yīng)在105±5%之間。
Hank's 平衡鹽溶液（HBS）要在空氣中使用，不需要CO2培養(yǎng)箱。原因是什么？Hank's 平衡鹽溶液（HBS）和Earle's平衡鹽溶液（EBS）有什么本質(zhì)的功能差別？
HBS和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagles （2.2g/L）中比在Hanks （0.35g/L） 中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡，以維持溶液的PH值。Eagles液在空氣水平的CO2 中，溶液會變堿，Hanks液在CO2培養(yǎng)箱中會變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織，需要用Eagles液，。如果僅僅是清洗將要在細胞培養(yǎng)基中儲存的組織，用Hanks液就可以了。