化工仪器网
技术文章
马朊病毒蛋白(PRNP) ELISA试剂盒使用说明书
阅读：82 发布时间：2025-7-18本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：
10pg/ml-500pg/ml
使用目的：
本试剂盒用于测定马血清、血浆及相关液体样本中朊病毒蛋白(PRNP)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中马朊病毒蛋白(PRNP)水平。用纯化的马朊病毒蛋白(PRNP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入朊病毒蛋白(PRNP)，再与HRP标记的朊病毒蛋白(PRNP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的朊病毒蛋白(PRNP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中马朊病毒蛋白(PRNP)浓度。
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
480pg/ml | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
240pg/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
120pg/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
60pg/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
30pg/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍（48T的20倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍（48T的20倍）稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
完整版说明书可咨询我司业务员。上海恒远生物科技有限公司是国内ELISA试剂盒优质供应商，代理销售不同ELISA试剂盒品牌的进口/国产ELISA试剂盒，专业供应科研实验所需的培养基，抗体，动物血清血浆，标准品对照品，化学试剂，酶联免疫试剂盒，白介素试剂盒，金标检测试剂盒，微生物，蛋白质，ELISA种属涵盖广，凭借多年行业经验，完善的售后服务，高质量的产品。如果您有实验上的问题欢迎来咨询。