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純水對(duì)于HPLC的影響
純水對(duì)于HPLC的影響
液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一種有效可靠的技術(shù)，目前已成為許多實(shí)驗(yàn)室研究的重要工具。HPLCzui常見(jiàn)的一個(gè)問(wèn)題就是溶劑中的污染物對(duì)分析結(jié)果的影響。
顆粒
顆粒可以損壞泵和注射器。顆粒也可以堵塞色譜柱并且熔化它，這會(huì)導(dǎo)致回壓增大。顆粒還會(huì)表現(xiàn)為另一種固相，可能改變樣品的組分。
有機(jī)物
超純水中的有機(jī)物可能影響色譜峰的分離度和積分、可能導(dǎo)致鬼峰、還可能改變固定相的選測(cè)性以及影響色譜基線(xiàn)。
離子
離子濃度的改變會(huì)影響分離結(jié)果，部分能吸收UV的離子會(huì)對(duì)峰產(chǎn)生影響。某些有腐蝕性離子的還會(huì)降低高壓輸液泵等配件的使用壽命。
膠體
膠體會(huì)不可逆的吸附在固定相上面，影響柱的分離效果。
微生物
微生物會(huì)堵塞色譜柱，其代謝產(chǎn)物會(huì)增加有機(jī)物，顆粒等污染物。
瓶裝純凈水和蒸餾水是目前部分HPLC分析中使用的純凈水，由于瓶裝純凈水和蒸餾水均只是普通純水而不是超純水，水中仍含有少量離子和有機(jī)物等雜質(zhì)，用以配制液相和洗脫液不僅可能污堵昂貴的色譜柱，也影響HPLC定出平坦的基線(xiàn)。
瓶裝純凈水的純化工藝，通常包括吸附、過(guò)濾、反滲透等，對(duì)顆粒性有機(jī)物的去除效果較好，但對(duì)微量離子及有機(jī)物的去除卻不能滿(mǎn)足高靈敏度的HPLC實(shí)驗(yàn)之需求，并且，由于其包裝通常多為PVC瓶，透氧率高，同時(shí)存在一定的化學(xué)溶出量，從而污染瓶中的純凈水，尤其是保存一段時(shí)間后，水質(zhì)下降更多，因此表現(xiàn)在HPLC色譜圖上，雖無(wú)特定吸收峰，但基線(xiàn)存在較嚴(yán)重的不穩(wěn)干擾。
蒸餾水是指用蒸餾方法制備的純水。可分一次和多次蒸餾水。水經(jīng)過(guò)一次蒸餾，不揮發(fā)的組分殘留在容器中被除去，揮發(fā)的組分進(jìn)入蒸餾水的初始餾分中，通常只收集餾分的中間部分，約占60％，要得到更純的水，可在一次蒸餾水中加入堿性高錳酸鉀溶液，除去有機(jī)物和二氧化碳；加入非揮發(fā)性的酸（硫酸或磷酸），使氨成為不揮發(fā)的銨鹽。通過(guò)對(duì)雙蒸水進(jìn)行HPLC檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)，254nm和214nm在22-27分鐘時(shí)都出現(xiàn)較強(qiáng)的吸收峰，這表明有疏水性較強(qiáng)的有機(jī)物污染，其原因應(yīng)是蒸餾過(guò)程的共沸現(xiàn)象導(dǎo)致了某些揮發(fā)性有機(jī)物去除不*。