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2012-1-18 閱讀(1640)
培育細(xì)胞無(wú)菌操作
1. 無(wú)菌操作辦公地區(qū)范圍應(yīng)維持保潔及寬闊，*東西，例如玻璃管架、吸管、汲取器或吸管盒等可以短時(shí)間之內(nèi)安放，其他實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70 ethanol 揩拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在臺(tái)面的中央無(wú)菌地區(qū)范圍，勿在邊緣的非無(wú)菌地區(qū)范圍培養(yǎng)箱KLYQ操作。
2. 實(shí)驗(yàn)施行前，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)（laminar flow） 以紫外燈映射30-60 分鐘滅菌，以70 ethanol 揩拭無(wú)菌操作臺(tái)面，并開(kāi)啟無(wú)菌操作颶風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10 分鐘后，才著手實(shí)驗(yàn)操作。每每操作只處置一株細(xì)胞株，且縱然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)相同亦不共享營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以防止差錯(cuò)淆惑或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完結(jié)后，將實(shí)驗(yàn)東西帶出辦公臺(tái)，以70 ethanol 揩拭無(wú)菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后，運(yùn)用霉菌培養(yǎng)箱或二氧化碳培養(yǎng)箱再施行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。
3. 謹(jǐn)慎取用無(wú)菌的實(shí)驗(yàn)東西，防止導(dǎo)致污染。勿碰觸吸管尖頭部或器皿瓶口，亦不要在敞開(kāi)的器皿正上方操作實(shí)驗(yàn)。器皿敞開(kāi)后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾側(cè)約45° 角取用，盡力勿將瓶蓋蓋口朝上安放桌面兒。
4. 辦公擔(dān)任職務(wù)的人應(yīng)注意自身的安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套兒后才施行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來(lái)自人的總稱(chēng)或是病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)尤其謹(jǐn)慎操作，并挑選合適等級(jí)的無(wú)菌操作臺(tái)（至少Class II）。操作過(guò)程中，應(yīng)防止引動(dòng)aerosol 的萌生，謹(jǐn)慎毒性藥品，例如DMSO 及TPA 等，并防止尖銳針頭的損害等。
5. 定期檢驗(yàn)測(cè)定下面所開(kāi)列項(xiàng)目：
a. CO2 鋼瓶的CO2 壓力
b. 二氧化碳培養(yǎng)箱的CO2 液體濃度、溫度、及水盤(pán)是否有污染（水盤(pán)的水用無(wú)菌水，每周改易）。
c. 無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)的airflow 壓力，定期改易太陽(yáng)燈管及HEPA 過(guò)淋膜，預(yù)濾網(wǎng)（300鐘頭/預(yù)濾網(wǎng)，3000 鐘頭/HEPA）。
