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2016-12-29 閱讀(885)
生化培養(yǎng)箱兩種基本使用方法
生化培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域，下面我們就來(lái)介紹下生活培養(yǎng)箱的多管發(fā)酵法與濾膜法。
1.濾膜法
生化培養(yǎng)箱濾膜是一種微孔性濾膜，孔徑0.45μm。將水樣注入已滅菌的放有濾膜的過(guò)濾器中，經(jīng)過(guò)抽濾，細(xì)菌即被截留在膜上，然后將濾膜貼于M-FC培養(yǎng)基上，在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24 h±2h。糞大腸菌群菌落在M-FC培養(yǎng)基上呈藍(lán)色或藍(lán)綠色，其他非糞大腸菌群菌落成灰色、淡黃色或無(wú)色。正常情況下，由于溫度和玫瑰酸鹽試劑的選擇性作用，在M-FC培養(yǎng)基上很少見(jiàn)到非糞大腸菌菌落。
2.多管發(fā)酵法
初發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
生化培養(yǎng)箱發(fā)酵管內(nèi)裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液，并在內(nèi)倒置有小玻璃管。每個(gè)樣品用三個(gè)不同的水樣量接種，同一接種水樣量要有五管，將水樣分別接種到裝有乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的 生化培養(yǎng)箱發(fā)酵管中，在37℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h。乳糖能起選擇作用，因?yàn)楹芏嗉?xì)菌不能發(fā)酵乳糖，而大腸菌群能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣。培養(yǎng)液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑，細(xì)菌產(chǎn)酸后，培養(yǎng)液即由原來(lái)的紫色變成黃色。產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管表明試驗(yàn)陽(yáng)性，如在倒管內(nèi)產(chǎn)氣不明顯，可輕拍發(fā)酵管，有小氣泡升起為陽(yáng)性。
復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
輕微振蕩初發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果的 生化培養(yǎng)箱發(fā)酵管，用3mm接種環(huán)將培養(yǎng)物(2-3環(huán))轉(zhuǎn)接到EC培養(yǎng)液中，在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h(提高培養(yǎng)溫度可造成不利于來(lái)自自然環(huán)境的大腸菌群的生長(zhǎng))。培養(yǎng)后立即觀察，發(fā)酵管產(chǎn)氣則證實(shí)為糞大腸菌群陽(yáng)性。
