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大師級牛人用CRISPR構(gòu)建癌癥類器官

2015-5-9  閱讀(221)

腸道上皮是人體內(nèi)細(xì)胞更新zui快的組織,可以迅速更新和修復(fù)腸粘膜,但這種能力也帶來了一定的風(fēng)險(xiǎn)。人們發(fā)現(xiàn),腸道的隱窩干細(xì)胞(Crypt stem cell)可能起始腫瘤形成,在腫瘤細(xì)胞的分化、增殖及凋亡中發(fā)揮重要作用。
用含有干細(xì)胞巢蛋白(WNT、R-spondin、表皮生長因子EGF)的培養(yǎng)基,可以長期培養(yǎng)小鼠和人類的腸道干細(xì)胞,生成遺傳學(xué)和表型穩(wěn)定的上皮類器官。荷蘭藝術(shù)與*科學(xué)院主席、美國國家科學(xué)院院士Hans Clevers教授領(lǐng)導(dǎo)研究團(tuán)隊(duì),利用CRISPR/Cas9技術(shù)建立了結(jié)直腸癌(CRC)類器官。這一研究成果發(fā)表在本周的Nature雜志上。
結(jié)直腸癌通常是由腺瘤緩慢發(fā)展而成,這說明結(jié)直腸癌發(fā)展很可能是一個(gè)陸續(xù)獲得基因突變的過程。研究人員將CRISPR/Cas9技術(shù)用于體外培養(yǎng)的人類腸道干細(xì)胞,陸續(xù)引入了四個(gè)zui常見的結(jié)直腸癌基因突變(APC、P53、KRAS和SMAD4)。他們通過去除培養(yǎng)基中的生長因子,來篩選發(fā)生了突變的細(xì)胞。
研究顯示,擁有四重突變的細(xì)胞不需要任何干細(xì)胞巢蛋白就能夠生長,而且還能耐受抑癌藥物Nutlin-3。這些細(xì)胞移植到小鼠體內(nèi)之后,長成了浸潤性的腫瘤。值得注意的是,APC和P53突變就足以引發(fā)廣泛的染色體數(shù)量異常(非整倍性),這是腫瘤發(fā)展的標(biāo)志性事件。
前不久也有研究團(tuán)隊(duì)采用類似的方法,通過CRISPR系統(tǒng)引入突變,建立了結(jié)直腸癌模型。Clevers指出,自己的結(jié)直腸癌發(fā)展模型能夠更貼切的反映活體內(nèi)的腫瘤發(fā)展,因?yàn)樗麄儗ν蛔兗?xì)胞進(jìn)行了篩選,而且所有sgRNA均靶標(biāo)突變熱點(diǎn)。(延伸閱讀:Nature醫(yī)學(xué):用CRISPR模擬癌癥)
作者簡介:
1991至2002年,Hans Clevers任荷蘭烏得勒支大學(xué)免疫學(xué)教授。2002年起Hans Clevers任該校分子遺傳學(xué)方面的教授。2002至2012年,Hans Clevers主管荷蘭Hubrecht研究所,從2012年開始成為荷蘭*藝術(shù)與科學(xué)院主席,2014年當(dāng)選為美國國家科學(xué)院院士。Hans Clevers是干細(xì)胞與癌癥生物領(lǐng)域大師級的科學(xué)家,克隆了TCF1基因,并將此干細(xì)胞在腸內(nèi)證實(shí)。Hans Clevers是生命科學(xué)突破獎(jiǎng)、法國榮譽(yù)騎士勛章、荷蘭獅子騎士勛章等榮譽(yù)獲得者。



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