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夾心紅細(xì)胞免疫試驗檢測與鑒定熱不穩(wěn)定腸毒素(LT)

2011-5-14  閱讀(491)

此法由Germant等(1987)報道,其檢測試劑為CTIgG致敏的綿羊紅細(xì)胞,故反應(yīng)結(jié)果可肉眼直觀。方法是以兔抗CTIgG包被V形聚乙烯板,每孔1OOμL,37□,4h后移至4℃,18h棄去末結(jié)合的抗體,用含O.1%tween-2O的PBS(PBS-T)洗3次,晾干后;加入15Oul熱滅活胎牛血清(5%),37℃作用兒,以封閉未結(jié)合鍵,棄封閉液,再以PBS-T洗滌3次,加入1OOml待檢菌培養(yǎng)物離心上清的濾液(O.22μL),28℃濕盒內(nèi)作用1h,洗滌后加入CT抗體致敏綿羊細(xì)胞(戊二醛法),室溫下靜置2-4h后,按常規(guī)血凝法判定標(biāo)準(zhǔn)觀察反應(yīng)結(jié)果。

經(jīng)與ELISA和Ver。細(xì)胞二法作平行對比試驗,結(jié)果基本一致。但本法簡便經(jīng)濟,毋需細(xì)胞培養(yǎng),尤其適用于大量標(biāo)本的檢測。
 



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