如何液相色谱系统的良好工作状态?
液相色谱系统的维护和保养方法:
一、液相色谱系统的流动相
保持贮液瓶清洁,定期清洗或更换;尽量使用HPLC级溶剂和试剂;含有缓冲盐和非HPLC级的流动相一定要过滤;含有缓冲盐的流动相应现用现配,防止微生物生长和组分改变。
1、更换流动相注意事项:
液相色谱常用的流动相包括多种有机溶剂、水、各种缓冲溶液等,它们之间存在互溶性的问题,同时也存在缓冲溶液盐析出的问题。
2、更换互溶性流动相将新流动相置于储液瓶中:
a. 打开放空阀,启动泵使新的流动相从放空阀出口流出20mL左右。
b. 关闭放空阀,然后将进样阀与色谱柱相连接端卸开,用小容器放置于进样阀的出口处。
c. 启动恒流泵,让流动相从进样阀出口流出10mL左右。
d. 重新连接色谱柱,设定适当流速,当流动相流出约30倍于色谱柱体积,并且检测器基线平衡后,流动相更换完毕。
3、更换非互溶性流动相:
a. 用中介溶剂更换泵中的旧流动相(不要接色谱柱)。
b. 如果色谱柱中流动相也需要更换,用该溶剂冲洗色谱柱。
c. 用新流动相更换中介溶剂。
4、更换缓冲液流动相:
a. 用5%~20%甲醇水更换色谱系统中缓冲液(包括色谱柱) 。(非常重要)
b. 用新流动相更换过渡溶剂。
c. 由于一般缓冲液遇到甲醇、异丙醇等高含量有机溶剂混合液时容易将缓冲液中的盐结晶出来,而结晶盐对密封圈、柱塞杆以及进样阀内部转子和定子都有很大的损坏,也容易阻塞输液管路,因此要特别仔细操作。
d. 用缓冲液作流动相或一段时间不使用泵,照以上步骤更换溶剂,然后用纯甲醇或乙腈冲洗。
二、泵头
泵的密封圈是泵较容易磨损的部件
1、泵的密封圈的维护保养:
每天要把泵中的缓冲液冲洗干净,防止盐沉积;用HPLC级试剂;用烧结不锈钢吸液过滤头;
2、进样阀
较易磨损:转子密封
3、保养事项:
a、样品进样前要过滤;
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c、不要用气相色谱用的尖头针进样。
4. 检测器
保持检测器清洁,每天与色谱柱一同清洗;
用脱过气的流动相,防止空气卡在检测池内;
检测器灯有一定寿命,不用时不要打开灯。但也不能够经??氐?。
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