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三月份東南大學(xué)張同學(xué)在我司購(gòu)買了小鼠干擾素系列試劑盒。他自我介紹是實(shí)驗(yàn)新手，之前沒(méi)有做過(guò)ELISA等相關(guān)實(shí)驗(yàn)。根據(jù)我司試劑盒提供的說(shuō)明書(shū)操作2加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。咨詢怎樣確定合適血清的稀釋梯度？

我司根據(jù)張同學(xué)沒(méi)有做過(guò)相關(guān)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)特此給客戶去提供了詳細(xì)的技術(shù)指導(dǎo)并通過(guò)我司銷售給以客戶文字答復(fù)。

現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室普遍采用方陣滴定法。即取不同的抗原抗體梯度做交叉實(shí)驗(yàn)，比如橫向包被抗原，豎向就用不同濃度抗體。抗原濃度范圍可以從500ng/孔開(kāi)始逐步稀釋，抗體的開(kāi)始稀釋倍數(shù)則要參考生產(chǎn)商的使用說(shuō)明書(shū). 血清用1%BSA稀釋，如果血清效價(jià)高，可以稀釋20000倍測(cè)定，一般都會(huì)做多個(gè)梯度，如稀釋1000，2000，4000，8000，16000倍。

恒遠(yuǎn)預(yù)祝張老師實(shí)驗(yàn)成功！