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上海研生實(shí)業(yè)有限公司

胚胎成纖維細(xì)胞,沙眼衣原體PCR檢測(cè)試劑盒

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葡萄糖脫氫酶(GCDH)測(cè)試盒

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商品屬性:

貨號(hào)

規(guī)格

檢測(cè)方法

YSH3381

100管/96樣

微量法

YSH3381-1

50管/48樣

紫外分光光度法


商品詳情:
葡萄糖脫氫酶(GCDH)測(cè)試盒測(cè)定意義:

GCDH(EC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H,大量存在于高等動(dòng)物的肝臟和弱氧化醋桿菌中。在低聚果糖生產(chǎn)中使用GCDH,不僅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量,而且生成的葡萄糖酸與鈣離子結(jié)合生成的是一種理

想的補(bǔ)鈣制劑。因而,GCDH已成為制備高含量低聚果糖的理想用酶。

測(cè)定原理:

GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH,在340nm下測(cè)定NADH上升速率,即可反映GCDH活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無(wú)水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。

試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。

標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液,4℃避光保存。


測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到570 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入10μL標(biāo)準(zhǔn)品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。

4. 測(cè)定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A測(cè)定管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定一次。

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