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線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測(cè)試盒
- 公司名稱：
- 參 考 價(jià)：
- 發(fā)布日期：
- 所 在 地：
- 生產(chǎn)地址：
- 已獲點(diǎn)擊：
- 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
- 210 - 390 （具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)）
- 2024-09-02 16:26:54
- 上海市
- 國產(chǎn)
- 1356
【詳細(xì)說明】
商品屬性：
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3488 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3488-1 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
商品詳情：
線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測(cè)試盒測(cè)定意義：
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH，細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH，在真核細(xì)胞中，NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。
測(cè)定原理：
MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸，導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶（棕色），4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇，蓋緊后充分混勻，再加入9.333 mL蒸餾水混勻，避光保存。
試劑四：粉劑×1管，4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水，充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1瓶，臨用前加10 mL蒸餾水，充分溶解。1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液，4℃避光保存。
測(cè)定操作：
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到570 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管：取EP管，加入10μL蒸餾水，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次，于570nm測(cè)定吸光值，記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，加入10μL標(biāo)準(zhǔn)品，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次，于570nm測(cè)定吸光值，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。
4. 測(cè)定管：取EP管，加入10μL上清液，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次，于570nm測(cè)定吸光值，記為A測(cè)定管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定一次。
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