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上海研生實業(yè)有限公司

胚胎成纖維細胞,沙眼衣原體PCR檢測試劑盒

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肉桂酸4羥化酶(C4H)測試盒

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【詳細說明】

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檢測方法

YSH3389

100管/96樣

微量法

YSH3389-1

50管/48樣

紫外分光光度法


商品詳情:
肉桂酸4羥化酶(C4H)測試盒測定意義:

C4H又稱反式肉桂酸-4-單氧化酶,多存在于高等植物、酵母、菌類中,該酶催化肉桂酸羥化作用產(chǎn)生4-香豆酸鹽,是苯丙烷途徑中繼L-苯丙氨解氨酶之后的第二個關(guān)鍵酶。

測定原理:

C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸鹽和NADPH,在340nm下測定NADPH生成速率,即可反映C4H活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。

試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。

標準品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標準液,4℃避光保存。


測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到570 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務必在30min內(nèi)測完。

3. 標準管:取EP管,加入10μL標準品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A標準管。顯色后務必在30min內(nèi)測完。

4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務必在30min內(nèi)測完。

注意:空白管和標準管只需要測定一次。

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